526-mel Cell:人黑色素瘤细胞系

"526-mel Cell:人黑色素瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：黑色素瘤
NPC-TW 039细胞系相关产品：Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞
ECC-10细胞系相关产品：LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞
TE-9细胞系相关产品：DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞
Hepatoma-22细胞系相关产品：NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
526-mel Cell:人黑色素瘤细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
P31FUJ细胞系相关产品：DHL-16细胞、ME1细胞、FU-OV-1细胞
HSC6细胞系相关产品：HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞系相关产品：SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞
H-209细胞系相关产品：253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞
细胞生长特性：贴壁
526-mel Cell:人黑色素瘤细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
B16-F10细胞系相关产品：Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
Mv.1.Lu细胞系相关产品：YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
SJCRH30细胞系相关产品：SBC-3细胞、RCC-10RGB细胞、NCI660细胞
HS-68细胞系相关产品：HCC-1438细胞、CCD-112 CoN细胞、ChaGo-K-1细胞
Okayama University Medical School-23细胞系相关产品：OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞
Ramos (RA 1)细胞系相关产品：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
hTERT RPE1细胞系相关产品：RPMI-8226细胞、MHCC97-H细胞、H-2108细胞
526-mel Cell:人黑色素瘤细胞系
GM00346细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、BT474细胞、HFL-1细胞
M21细胞系相关产品：NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞
32Dcl3细胞系相关产品：NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞
H-211细胞系相关产品：SUM 190细胞、HT1197细胞、CEM C7细胞
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
NCIH520细胞系相关产品：SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞
C-127细胞系相关产品：McARH7777细胞、TOV112细胞、BPH-1细胞
251 MG细胞系相关产品：2BS细胞、NCIH1618细胞、Hep G2/C3A细胞
COLO357细胞系相关产品：NCI-H810细胞、WM-239-A细胞、Anip-973细胞
COLO357细胞系相关产品：NCI-H810细胞、WM-239-A细胞、Anip-973细胞
JROECL 19细胞系相关产品：BI-Mel细胞、KRC Y细胞、HBSMC细胞
CAKI1细胞系相关产品：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
HPaSteC(HPSC)细胞系相关产品：C3H-10T1/2细胞、MyLa 2059细胞、HEL-92细胞
KYSE-410细胞系相关产品：TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞
SU86-86细胞系相关产品：H-4细胞、S3 HeLa细胞、UPCI:SCC090细胞
MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
FO [Mouse myeloma]细胞系相关产品：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞
SU-DHL6细胞系相关产品：HuT78细胞、NCI-H661细胞、IOSE-29细胞
RPMI-8226S细胞系相关产品：RCSMC细胞、C32 mel细胞、HT115细胞
MV(4;11)细胞系相关产品：PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞
WM-239A细胞系相关产品：KYSE 410细胞、BRL-3A细胞、Mel-624细胞
WM-239A细胞系相关产品：KYSE 410细胞、BRL-3A细胞、Mel-624细胞
NCI-H1770细胞系相关产品：SKGIIIA细胞、HuH28细胞、TK.10细胞
T47D:A细胞系相关产品：PL-45细胞、FLC7细胞、OACP4 C细胞
GM17219细胞系相关产品：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞
NCIH1734细胞系相关产品：SUDHL-1细胞、NCI-H1395细胞、SW-403细胞
IEC-6细胞系相关产品：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
SK-Mel 1细胞系相关产品：Hs 683细胞、KYSE 140细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞
C4-2 B细胞系相关产品：AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞
K-1735细胞系相关产品：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
NCI-H2073细胞系相关产品：Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞
MH7A细胞系相关产品：HOK细胞、BHP-10细胞、H1793细胞
A431细胞系相关产品：HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞
MDAMB361细胞系相关产品：HuH-6细胞、SW1783细胞、HT1080细胞
FRhK4细胞系相关产品：NCIH508细胞、CCLP-1细胞、Tn 5B1-4细胞
H1650_CO细胞系相关产品：SNGM细胞、SW948细胞、H295R细胞
HCCC9810细胞系相关产品：Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞
COLO824细胞系相关产品：U87MG细胞、G422细胞、H146细胞
KG-1细胞系相关产品：SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞
HPAF细胞系相关产品：Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞
VM-CUB1细胞系相关产品：HSC4细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞、SW-948细胞
GM06141B细胞系相关产品：MGH-U1 (EJ)细胞、SN12-PM6细胞、H-719细胞
MDA436细胞系相关产品：UMR106细胞、HCE-T细胞、Anip 973细胞
526-mel Cell:人黑色素瘤细胞系
TB1 Lu细胞系相关产品：SK_HEP1细胞、P3HR-1细胞、LA-N-1细胞
SNU-423细胞系相关产品：CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞
NCIH2452细胞系相关产品：B-3细胞、NMCG1细胞、HPMEC细胞
L 929细胞系相关产品：SUNE-1细胞、HPAF-II/CD18细胞、H711细胞
NCI-H322细胞系相关产品：CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
LS174细胞系相关产品：HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞
PSN-1细胞系相关产品：BJ1细胞、NB-19细胞、293E细胞
LUDLU 1细胞系相关产品：HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞
L 1210细胞系相关产品：BHP10-3细胞、NCI-SNU-5细胞、NCI-H2073细胞
H-510A细胞系相关产品：HUT28细胞、Line 207细胞、McCoy细胞
AU565细胞系相关产品：BV2细胞、COLO-741细胞、RL-952细胞
HEY-A8细胞系相关产品：H1395细胞、D10细胞、VMRC-RCZ细胞
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