"KLM-1 Cell:人胰腺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
CCD841CoN细胞系相关产品：Molm 14细胞、Hep2细胞、Hs742T细胞
JCA-1细胞系相关产品：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞
HSC5细胞系相关产品：SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
Jurkat-77细胞系相关产品：Human fetal lung fibroblast 1细胞、CP-70细胞、686LN-M4e细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KLM-1 Cell:人胰腺癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
hRPTC细胞系相关产品：PANC0504细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞、KCL-22细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品：OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
SNU119细胞系相关产品：MDA1386细胞、MUTZ-3细胞、CL1-0细胞
SNU739细胞系相关产品：CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞
PaTu-8988s细胞系相关产品：8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
KLM-1 Cell:人胰腺癌细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
GM02219D细胞系相关产品：RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
HuT 78细胞系相关产品：LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
CCLP-1细胞系相关产品：NPC-TW-039细胞、CORL51细胞、A20细胞
H358细胞系相关产品：P3/NS1/1-Ag4.1细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、ACC-2细胞
Rat Fetal Lung-6细胞系相关产品：JB6 [Mouse]细胞、HUV-EC-C细胞、SK-MEL-2细胞
SW-626细胞系相关产品：Malme-3 M细胞、TALL 1细胞、SK-N-BE(2)细胞
KLM-1 Cell:人胰腺癌细胞系
Clone Y1细胞系相关产品：COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞
HPAF2细胞系相关产品：EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
KYSE70细胞系相关产品：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
HCC1438细胞系相关产品：SK-N-BE-2细胞、OVCA-433细胞、A-673细胞
KGN细胞系相关产品：SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞
Tu-212细胞系相关产品：SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
HCA-7细胞系相关产品：VP267细胞、Hep G2-Luc细胞、PBL细胞
H-2107细胞系相关产品：rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
HCE-T细胞系相关产品：Panc-8_13细胞、CBRH-7919细胞、HTh-74细胞
HCE-T细胞系相关产品：Panc-8_13细胞、CBRH-7919细胞、HTh-74细胞
RLE-6TN细胞系相关产品：C3H10T1/2CL8细胞、U-251MG细胞、RWPE-1细胞
H-157细胞系相关产品：U266 B1细胞、NCI-H1876细胞、Panc10.05细胞
OEC33细胞系相关产品：ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞
32D/cl3细胞系相关产品：H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞
KYSE 270细胞系相关产品：HOP92细胞、Hs739T细胞、G-361细胞
VSC4.1细胞系相关产品：UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞
Jiyoye(P-2003)细胞系相关产品：Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞
KYSE-140细胞系相关产品：MDA-MB-453细胞、PCI-SG231细胞、BV-2细胞
Ishikawa细胞系相关产品：C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
C26细胞系相关产品：LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞
HCEC细胞系相关产品：HARAB细胞、VSC4.1细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞
CCD19-Lu细胞系相关产品：UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞
ND7/23细胞系相关产品：BA/F3细胞、LN229细胞、P3X63 Ag8细胞
T8细胞系相关产品：Lu-65细胞、SK-SH-SY5Y细胞、RCC23细胞
IAR 20细胞系相关产品：NG-108-15细胞、N9细胞、293 F细胞
C33-A细胞系相关产品：OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞
PLC/PRF5细胞系相关产品：KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
MCCAR细胞系相关产品：TGHAVSMC细胞、U266 B1细胞、H1437细胞
A2780/Taxol细胞系相关产品：RT112细胞、OVMANA细胞、HSC/mHSC细胞
H889细胞系相关产品：MDAMB415细胞、MDA.MB.435细胞、Ramos 2G6 4C10细胞
SU-DHL-8细胞系相关产品：CII细胞、HMrSV5细胞、MCA38细胞
Ramos-2G6-4C10细胞系相关产品：BT 549细胞、PANC0327细胞、COS7细胞
HCV 29细胞系相关产品：Ly19细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、OSRC2细胞
MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
CNE2细胞系相关产品：WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞
COLO-320-HSR细胞系相关产品：OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞
U-87-MG细胞系相关产品：MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
HDLM2细胞系相关产品：HT-115细胞、HIC细胞、Duke University 4475细胞
SK-MEL2细胞系相关产品：COLO824细胞、NCIH2286细胞、NBL-2细胞
MKN45细胞系相关产品：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞
Panc 3.27细胞系相关产品：J774细胞、P3JHR-1细胞、HS852.T细胞
RINm5F细胞系相关产品：AMO1细胞、U138MG细胞、SKHEP-1细胞
H1954细胞系相关产品：Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
KLM-1 Cell:人胰腺癌细胞系
RC-4B/C细胞系相关产品：SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品：NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞
MARC-145细胞系相关产品：MC-26细胞、HUVEC细胞、HOMEC细胞
HUCCT1细胞系相关产品：Hs-343-T细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞、Bx-PC3细胞
HSC-1细胞系相关产品：293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
HHFK细胞系相关产品：HEMCSS细胞、MDA-MB-134细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞
EAhy926细胞系相关产品：Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
JB6 clone 30, subclone 7b细胞系相关产品：JB6 Cl 30细胞、RS4;11细胞、RC92A细胞
OCI Ly19细胞系相关产品：H-3255细胞、M-20细胞、HCC70细胞
TE14细胞系相关产品：C3H/10T1/2 clone 8细胞、OVCAR10细胞、7404细胞
MX-1细胞系相关产品：HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞
V-79-4细胞系相关产品：HBZY 1细胞、HDLM2细胞、FRO细胞
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