"ZR-75-1 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系 细胞背景资料:该细胞产生高水平的黏液素MUC-1 mRNA,低水平的MUC-2 mRNA,但不表达MUC-3基因;表达雌激素受体。 细胞形态:上皮细胞样 细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。 RBL 2H3细胞系相关产品:NCIH2023细胞、UPCI-SCC-90细胞、C4-2细胞 MHCC 97-L细胞系相关产品:CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞 MIA PaCa-2细胞系相关产品:NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞 细胞生长:贴壁 ZR-75-1 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。 细胞传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次。 138MG细胞系相关产品:TYKnu细胞、HEK293-EBNA1细胞、DrG细胞 U87MG细胞系相关产品:OE-19细胞、EFM-192C细胞、BHK 21细胞 LC1细胞系相关产品:PAa细胞、EA. hy 926细胞、AN3 CA细胞 MXI细胞系相关产品:Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞 CEM-C1细胞系相关产品:Reuber H35细胞、AG06814-J细胞、Hs 729细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 ZR-75-1 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮样 为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。 SNU-719细胞系相关产品:HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞 KLN 205细胞系相关产品:MDA-MB-175细胞、COLO357细胞、Hep3B细胞 HTori-3细胞系相关产品:LM6细胞、Hs 746T细胞、MUG-Chor1细胞 rUCMSCs细胞系相关产品:HEK.EBNA细胞、SB细胞、ME16C细胞 TALL 1细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-12F细胞、SW837细胞、MPC-5细胞 Human Foreskin Fibroblast细胞系相关产品:STC-1细胞、LoMeT-ccRcc细胞、H-1882细胞 MyLa2059细胞系相关产品:SKMEL-24细胞、PC 61 5.3细胞、NCI-H1781细胞 SNU16细胞系相关产品:CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞 H209细胞系相关产品:HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞 HPAF2细胞系相关产品:EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞 ZR-75-1 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系 KTCTL-140细胞系相关产品:C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞 IPAM-WT细胞系相关产品:Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞 Tn5B1-4细胞系相关产品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞 H23细胞系相关产品:EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞 U-2932细胞系相关产品:Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞 HOP62细胞系相关产品:UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞 HOP62细胞系相关产品:UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞 ADR-RES细胞系相关产品:SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞 Karpas-299细胞系相关产品:HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞 KM.12细胞系相关产品:HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞 hFOB细胞系相关产品:H.Ep. No. 2细胞、NCI-446细胞、COV 504细胞 NCIH1734细胞系相关产品:SUDHL-1细胞、NCI-H1395细胞、SW-403细胞 HUT28细胞系相关产品:COLO 320 HSR细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞、QSG7701细胞 KM.12细胞系相关产品:HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞 WIL2 Secreting细胞系相关产品:H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞 OCIAML2细胞系相关产品:DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞 SUDHL-8细胞系相关产品:SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞 Tca-83细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-33细胞、NCI-H1648细胞、NCI-H1355细胞 IPAM-WT细胞系相关产品:Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞 NS20-Y细胞系相关产品:F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞 HCC-1569细胞系相关产品:WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞 KPL-1细胞系相关产品:GM2219C细胞、WC00044细胞、Hs 940.T细胞 Walker-Ca.256细胞系相关产品:Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞 WM 115细胞系相关产品:FU-OV-1细胞、N-2a细胞、BT325细胞 SO-Rb 50细胞系相关产品:293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞 HO8910细胞系相关产品:HEC-1B细胞、HBZY 1细胞、H-2330细胞 HCC-2108细胞系相关产品:Human Embryonic Skin细胞、N-9细胞、KYSE-520细胞 KRCY细胞系相关产品:MDCK-II细胞、Ly18细胞、MDA231-LM2细胞 OVCAR420细胞系相关产品:SiHa细胞、MDA MB 134VI细胞、SF767细胞 SW1271细胞系相关产品:BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞 10T1/2细胞系相关产品:BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞 Wistar Institute, Susan Hayflick细胞系相关产品:HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞 Colon 38细胞系相关产品:SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞 Line 870 Emory University-4细胞系相关产品:CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞 MIN6细胞系相关产品:NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞 UMNSAH-DF-1细胞系相关产品:U343MG细胞、WM115mel细胞、VAESBJ细胞 V-79细胞系相关产品:NCI-SNU-5细胞、H9细胞、SKM1细胞 A2780/Taxol细胞系相关产品:RT112细胞、OVMANA细胞、HSC/mHSC细胞 SKOV-433细胞系相关产品:H1703细胞、Hs 729.T细胞、MC-26细胞 MSF细胞系相关产品:H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞 DH-82细胞系相关产品:PANC-03-27细胞、CMT167细胞、BC-009细胞 M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品:NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞 Hs739T细胞系相关产品:OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞 Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品:A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞 UPCI-SCC-154细胞系相关产品:C-28/I2细胞、NCIH209细胞、WM-115细胞 Human Liver-7702细胞系相关产品:JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞 Z138细胞系相关产品:NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞 H-1930细胞系相关产品:PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞 HOP 62细胞系相关产品:SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞 LS180细胞系相关产品:SW982细胞、MDA-MB453细胞、Hs 294T细胞 Rat Glomerular Endothelial细胞系相关产品:NCIH747细胞、JeKo-1细胞、NCI747细胞 ZR-75-1 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系 SK-Mel1细胞系相关产品:PC-3M-2B4细胞、OVCAR-433细胞、Ketr3细胞 OCI/AML5细胞系相关产品:ACC3细胞、H650细胞、Malme-3M细胞 Meat Animal Research Center-145细胞系相关产品:Hu-P-T3细胞、SNU-719细胞、MIA Paca2细胞 HTori3细胞系相关产品:GM637A细胞、BIU-87/Adr细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞 "
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