"SK-CO-1 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系 细胞背景资料:该细胞来源于结直肠病人的转移性腹水。 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 TE-3A细胞系相关产品:COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞 CHO-Lec1细胞系相关产品:H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞 HD-LM-2细胞系相关产品:EOC 20细胞、GM04679细胞、FU-MMT-1细胞 细胞生长:贴壁 SK-CO-1 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:1:2-1:3传代,每周2-3次。 MDAMB415细胞系相关产品:293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞 SKO3细胞系相关产品:143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞 IEC 6细胞系相关产品:NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞 WI-38细胞系相关产品:RD细胞、LMTK-细胞、OCI-AML3细胞 5-8F细胞系相关产品:Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 SK-CO-1 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞样 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 A-172 MG细胞系相关产品:HCC-827细胞、COLO-824细胞、MEC1细胞 CEM/0细胞系相关产品:NCI-H1734细胞、GM01232E细胞、NTera-2D1细胞 K-1735细胞系相关产品:786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞 A-431细胞系相关产品:RL95-2细胞、Raji细胞、SKBR-3细胞 A253细胞系相关产品:RPE-hTERT细胞、ME16C细胞、LED-WiDr细胞 NCI-446细胞系相关产品:RM1细胞、H1522细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞 NCTC-929细胞系相关产品:SW1417细胞、HGSMC细胞、HO8910PM细胞 Sp2/mIL-6细胞系相关产品:MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞 PA317细胞系相关产品:R 2 C细胞、Panc04.03细胞、H3396细胞 MFHL-2细胞系相关产品:Normal fibroblast-10细胞、KLN205细胞、H-2198细胞 SK-CO-1 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系 MDA175细胞系相关产品:SK-MEL28细胞、HN6细胞、MDA-MB-435细胞 KE37细胞系相关产品:H2107细胞、J111细胞、M14细胞 NCIH820细胞系相关产品:HBE细胞、SNU-668细胞、SKBr3细胞 OVCAR 5细胞系相关产品:Nb-2细胞、MTC-TT细胞、SW527细胞 MSTO-211H细胞系相关产品:H-748细胞、Bx-PC3细胞、ECGI10细胞 GM05887细胞系相关产品:RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞 GM05887细胞系相关产品:RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞 Hs274T细胞系相关产品:NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞 Daoy细胞系相关产品:KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞 NUGC4细胞系相关产品:HCEpiC细胞、IGROV-1细胞、TGW-nu-1细胞 SJ-RH30细胞系相关产品:SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞 EA.hy 926细胞系相关产品:RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞 Epstein-Barr-1细胞系相关产品:HIT T-15细胞、HCC1359细胞、MDCC-MSB-1细胞 H-510细胞系相关产品:LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞 MC38细胞系相关产品:QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞 MyLa 2059细胞系相关产品:B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞 HOP 62细胞系相关产品:SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞 HIEC细胞系相关产品:Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞 H-1882细胞系相关产品:IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞 WBF344细胞系相关产品:HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞 OCI-AML-3细胞系相关产品:HS-294T细胞、MHCC-97细胞、UMUC3细胞 HOK细胞系相关产品:T98 G细胞、HSC-2细胞、SW962细胞 NIH:OVCAR4细胞系相关产品:Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞 SJ-RH30细胞系相关产品:SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞 CHO Lec1细胞系相关产品:Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞 DrG细胞系相关产品:H1373细胞、OAW42细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞 WEHI 164细胞系相关产品:HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞 SV40-HCEC细胞系相关产品:IOSE-Mar细胞、Capan 2细胞、Nthy ori 3.1细胞 Hs 766T细胞系相关产品:HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞 RSC-364细胞系相关产品:NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞 SKCol1细胞系相关产品:AtT 20细胞、NCIH250细胞、OVCAR-8/ADR细胞 GOS-3细胞系相关产品:SW-837细胞、8305C_1细胞、OV-90细胞 FHs74 Int细胞系相关产品:HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞 NCI-H1954细胞系相关产品:TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞 EBTr细胞系相关产品:RWPE2细胞、SNU869细胞、TSU-Pr1细胞 NCI-H747细胞系相关产品:C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞 SK-SH-SY5Y细胞系相关产品:QGY-7701细胞、SKO007细胞、RS4;11细胞 HUT28细胞系相关产品:COLO 320 HSR细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞、QSG7701细胞 BC-021细胞系相关产品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞 TE 85.T细胞系相关产品:BE(2)M17细胞、RPTEC/TERT1细胞、GA-10 (Clone 4)细胞 HPAF/CD18细胞系相关产品:MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞 A101D细胞系相关产品:SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞 FU-OV-1细胞系相关产品:NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞 NCIH650细胞系相关产品:K7M2 wt细胞、T 24细胞、MDA-361细胞 Hopkins-92细胞系相关产品:SKBr3细胞、H1650细胞、Panc 4.03细胞 95C细胞系相关产品:BT474细胞、Lu-99A细胞、UO.31细胞 PANC-28细胞系相关产品:CHAGOK1细胞、NCI-H510A细胞、H-EMC-SS细胞 MGC-803细胞系相关产品:NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞 H87细胞系相关产品:LNCaP-ATCC细胞、HEK293F细胞、RC-2细胞 NCIH1573细胞系相关产品:CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞 NS-1细胞系相关产品:MADB 106细胞、MLOY4细胞、KYSE-140细胞 SK-CO-1 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系 HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞系相关产品:QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞 HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品:N1S1细胞、HET1A细胞、L-428细胞 NUGC-2细胞系相关产品:LNCaP C4-2细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、PL-12细胞 K 562细胞系相关产品:Walker/LLC-WRC 256细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、SNU16细胞 "
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