"GM00637 Cell:人皮肤成纤维细胞系
细胞形态：成纤维细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
AU-Mel细胞系相关产品：RKO-AS45-1细胞、B 95-8细胞、NCI-157细胞
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞
NCC-IT细胞系相关产品：NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
Jurkat77细胞系相关产品：HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
GM00637 Cell:人皮肤成纤维细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
M1细胞系相关产品：VM-CUB-1细胞、COLO-320细胞、MDA-MB-435S细胞
C26细胞系相关产品：LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞
Hx147细胞系相关产品：343 MG细胞、BJAB细胞、COLO 394细胞
NFS 60细胞系相关产品：CHO细胞、NCI-SNU-761细胞、Malme3M细胞
HCC-1833细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
GM00637 Cell:人皮肤成纤维细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
Hs445细胞系相关产品：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞
MDA435细胞系相关产品：NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
NCIH209细胞系相关产品：LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞
MMAc.SF细胞系相关产品：PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞
MC-4细胞系相关产品：SUIT2细胞、PTK-2细胞、CAL-85-1细胞
EJ 138细胞系相关产品：IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞
Rainbow Trout Embryo细胞系相关产品：SupB15W细胞、BOWES细胞、TOG细胞
GM00637 Cell:人皮肤成纤维细胞系
MT-2J细胞系相关产品：SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞
H-1793细胞系相关产品：ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
SKNEP细胞系相关产品：U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞
SW480细胞系相关产品：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞
IOSE29细胞系相关产品：C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
P31/Fujioka细胞系相关产品：B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
BOWES细胞系相关产品：T 24细胞、MDA 435细胞、3T3-A31细胞
HGE细胞系相关产品：Hs343T细胞、ECGI10细胞、A-2058细胞
C3H/10T1/2细胞系相关产品：JIMT-1细胞、SF763细胞、RTMC细胞
C3H/10T1/2细胞系相关产品：JIMT-1细胞、SF763细胞、RTMC细胞
Tokyo Medical and Dental university 8细胞系相关产品：CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞
HAEC细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney 21细胞、A-72细胞、DU4475细胞
HMEL细胞系相关产品：Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞
RCF细胞系相关产品：HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞
H-1155细胞系相关产品：143BTK-细胞、LN 229细胞、hADSCs细胞
SW 579细胞系相关产品：ATN-1细胞、WM 115细胞、EPC细胞
CEMC1细胞系相关产品：DK-MG细胞、H9c2 (2-1)细胞、MDCK.2细胞
NCL-H548细胞系相关产品：MOLM13细胞、HH [Human lymphoma]细胞、BEAS 2B细胞
H-2330细胞系相关产品：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
SP2细胞系相关产品：CCD1095Sk细胞、SW 13细胞、HPB-ALL细胞
CEM-CCRF (CAMR)细胞系相关产品：H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品：1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
KP-N-RT-BM细胞系相关产品：HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞
LCLC-103H细胞系相关产品：Mouse Forestomach Carcinoma细胞、RPMI 7666细胞、PA-TU-8988S细胞
293-F细胞系相关产品：PC3M-IE8细胞、JIII细胞、C8161细胞
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞
Panc 02.03细胞系相关产品：HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、VK2/E6E7细胞、CCD-841CoN细胞
GL-261细胞系相关产品：Hs-746T细胞、NCI-H1623细胞、CCLP-1细胞
Hs 895 T细胞系相关产品：CP-70细胞、THP-1细胞、MLTC-1细胞
SUDHL2细胞系相关产品：L-M (TK-)细胞、SV-HUC细胞、NCTC929细胞
MSB-1细胞系相关产品：WEHI3细胞、MC57细胞、NBL-5细胞
DanG细胞系相关产品：207细胞、TGW细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞
Panc8.13细胞系相关产品：GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
JF305细胞系相关产品：HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞
HUT-28细胞系相关产品：P-815细胞、Hut292细胞、NMCG1细胞
HDSMC细胞系相关产品：LTEPsm细胞、MHH-CALL-2细胞、Kit 225-K6细胞
HANK细胞系相关产品：BJAB-1细胞、HCT/FU细胞、SUP-B1细胞
OLN-93细胞系相关产品：SRA 01/04细胞、C3H/10T1/2细胞、NS1/1-Ag4.1细胞
SKNEP细胞系相关产品：U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞
SKNEP细胞系相关产品：U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞系相关产品：Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞
HSC2细胞系相关产品：HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞
GM00637 Cell:人皮肤成纤维细胞系
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
HCC941122细胞系相关产品：NCI-H1963细胞、Blotchy fibroblast-11细胞、H-1793细胞
HPAF/CD18细胞系相关产品：MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
SK N SH细胞系相关产品：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
EFM-192A细胞系相关产品：H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞
746T细胞系相关产品：MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞
Helacyton gartleri细胞系相关产品：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
U266细胞系相关产品：MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞
MOVAS细胞系相关产品：SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞
SW-13细胞系相关产品：B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞
MPC 11细胞系相关产品：KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞
MEF细胞系相关产品：OKAC1细胞、SK Col 1细胞、MCF-12A细胞
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