细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
中文名称:细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
英文名称:DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
产品规格:50次
本试剂盒是目前最先进的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder,同时又可以抽提到50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。 DNA ladder也称DNA fragmentation,是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder,就可以判定细胞发生了凋亡。 样品首先被蛋白酶K消化,随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液,然后加入到纯化柱内。通过高速离心,使DNA在穿过纯化柱的瞬间,结合到纯化柱上,随后通过两次洗涤去除各种杂质,最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,样品裂解后仅需约15分钟即可完成。 通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚氯仿抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A,可以获得不含RNA的高纯度总DNA,排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。 本试剂盒每次最多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多,反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA,每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA,每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA,每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量,样品用量能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。 对于培养细胞的凋亡检测,通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。 试剂盒组份: 样品裂解液A——————10ml 样品裂解液B——————11ml 洗涤液I——————21ml(次使用前加入7ml无水乙醇) 洗涤液II——————16ml (次使用前加入24ml无水乙醇) 洗脱液——————22ml 蛋白酶K——————1.1ml RNase A——————220μl DNA纯化柱及废液收集管——————50套 注意事项: 1. 温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生,属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混匀后使用。 2. 次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇,洗涤液II需添加24ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。 3. 本试剂盒需使用55℃或70℃水浴,请提前作好准备。 4. 除特别说明外,每次Vortex应控制在5-10秒左右。 5. 本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。 6. 废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。 储存条件:室温,有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
上海泽叶生物科技有限公司
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