B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系

"B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系
细胞背景资料：晶状体；Ad１２-SV４０转化；男性
细胞形态：上皮细胞样
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
WIL2 Secreting细胞系相关产品：H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞
DMS-79细胞系相关产品：U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞
RK-13细胞系相关产品：CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞
细胞生长：贴壁
B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞
ST 486细胞系相关产品：HCEC-B4G12细胞、KLN 205细胞、BMF细胞
MES13细胞系相关产品：FTC-133细胞、COLO201细胞、A-2780细胞
OCILY3细胞系相关产品：Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
MHCC 97-L细胞系相关产品：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
CAL-85-1细胞系相关产品：SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞
BNCL2细胞系相关产品：H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞
H1404细胞系相关产品：He-La细胞、Hs-343-T细胞、PT-67细胞
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
293GP细胞系相关产品：BT.549细胞、H-23细胞、R3/1细胞
MDA-MB-361细胞系相关产品：LICR-LON-HN6细胞、FU-MMT-1细胞、Walker256-TC细胞
SKOV3细胞系相关产品：MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞
697细胞系相关产品：NUGC3细胞、CCD 841 CoN细胞、NCI-H841细胞
Farage细胞系相关产品：NRK clone 52E细胞、NTera2/D1细胞、H-1522细胞
TCC-PAN2细胞系相关产品：Suzhou Human Glioma-44细胞、LMH细胞、IOSE-Van细胞
B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系
KRC Y细胞系相关产品：L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
746T细胞系相关产品：MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞
FRTL-5细胞系相关产品：Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞
NCI-SNU-886细胞系相关产品：SJSA-1细胞、MGC-803细胞、R 2 C细胞
LS123细胞系相关产品：HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
HSC3细胞系相关产品：Panc3_27细胞、NCI-H498细胞、HuTu-80细胞
CAL-78细胞系相关产品：NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
SJ-Rh 30细胞系相关产品：LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
675T细胞系相关产品：L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞
CHP 100细胞系相关产品：PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞
NCI-H1568细胞系相关产品：MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞
HT115细胞系相关产品：OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞
NCIH1568细胞系相关产品：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
Hep 3B细胞系相关产品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SNGM细胞、HEK 293 c18细胞
MDCK II细胞系相关产品：SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞
OCI-AML-3细胞系相关产品：HS-294T细胞、MHCC-97细胞、UMUC3细胞
DiFi细胞系相关产品：SUDHL10细胞、MLM细胞、8305C细胞
BC3H-1细胞系相关产品：769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞
149 PT细胞系相关产品：Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品：SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
HuP-T4细胞系相关产品：LAN-6细胞、OCI/AML-2细胞、EL4细胞
BEL 7404细胞系相关产品：Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞
UMUC-14细胞系相关产品：HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞
HemECs细胞系相关产品：Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞
MDA-MB-231细胞系相关产品：KYSE70细胞、MLA-144细胞、CTX TNA2细胞
190PT细胞系相关产品：Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
NE-1细胞系相关产品：159 PT细胞、MGC803细胞、HSC-6细胞
Ramos(RA1)细胞系相关产品：IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞
PANC-10-05细胞系相关产品：SNU-878细胞、TGBC11TKB细胞、B16 BL6细胞
WB-F344细胞系相关产品：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞
NCI-HUT-460细胞系相关产品：TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞
Panc 10.05细胞系相关产品：U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞
HC-11细胞系相关产品：Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞
MN-9D细胞系相关产品：Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞
Daudi细胞系相关产品：SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞
DU 145细胞系相关产品：Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞
H2172细胞系相关产品：alphaTC clone 6细胞、Med 341细胞、MKN74细胞
NB19-RIKEN细胞系相关产品：MODE-K细胞、NCI-H2342细胞、IPEC-J2细胞
NPA细胞系相关产品：Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞
NCIH1385细胞系相关产品：P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞
HEC-1-A细胞系相关产品：WSU-DLCL2细胞、U-87 MG细胞、Ramos.2G6.4C10细胞
HGC27细胞系相关产品：SK BR 03细胞、MDA-134细胞、Hep G2细胞
NTERA-2/D1细胞系相关产品：RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞
Tb1Lu细胞系相关产品：J-774细胞、SUM-52细胞、BE(2)C细胞
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
SW-1271细胞系相关产品：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
H292细胞系相关产品：SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
H19-7细胞系相关产品：GM07404细胞、OCI AML2细胞、SCL-II细胞
LK 2细胞系相关产品：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
SK-MEL-MeWo细胞系相关产品：SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞
H2052_MM细胞系相关产品：SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞
B-3 epithelioid cells人晶状体上皮细胞系
NCI-H2110细胞系相关产品：E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞
WSU-DLCL(2)细胞系相关产品：MDCK细胞、NL-20细胞、CL-11细胞
HS5细胞系相关产品：huH 1细胞、SK-MES-1细胞、Clone 929细胞
H1395细胞系相关产品：MIO-M1细胞、BRL3A细胞、CT26.WT细胞
"