"RBE4 epithelioid cells大鼠脑血管内皮细胞系 细胞背景资料:2型腺病毒转化;SD大鼠 细胞形态:上皮细胞样 贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉! NCTC 1469细胞系相关产品:WiDrTC细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞、HCC-1171细胞 HuCC-T1细胞系相关产品:HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞 LC2/Ad细胞系相关产品:RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞 细胞生长:贴壁 RBE4 epithelioid cells大鼠脑血管内皮细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 CAL-120细胞系相关产品:Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞 REC-1细胞系相关产品:NCI-H-82细胞、MDA-MB 361细胞、SY5Y细胞 OAW42细胞系相关产品:EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞 SkMel31细胞系相关产品:CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞 HEK293S细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-12A细胞、SUM149PT细胞、LNCaP.FGC细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 RBE4 epithelioid cells大鼠脑血管内皮细胞系 细胞生长特性:贴壁 细胞形态特性:详见细胞说明书 细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。 MCFs细胞系相关产品:HEK (AD293)细胞、PG-4 S+L-细胞、Ramos.G6.C10细胞 L-5178-Y-R细胞系相关产品:WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞 MM.1S细胞系相关产品:HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞 Kit225-K6细胞系相关产品:NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞 WM-115细胞系相关产品:NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞 ARO81-1细胞系相关产品:IBRS2细胞、Bowes melanoma cells细胞、CoCL2细胞 CMT-64细胞系相关产品:GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞 UK Pan-1细胞系相关产品:HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞 H-1963细胞系相关产品:CTX TNA2细胞、OCI-AML-4细胞、SK-MEL24细胞 RSC96细胞系相关产品:PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞 RBE4 epithelioid cells大鼠脑血管内皮细胞系 L-540细胞系相关产品:FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞 LNCaP-ATCC细胞系相关产品:MLA 144细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞、P3HRI细胞 UMUC1细胞系相关产品:HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞 Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品:52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞 no.11细胞系相关产品:HCE-2 [50.B1]细胞、THC-8307细胞、HCA-7细胞 HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品:N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞 HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品:N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞 CCK-81细胞系相关产品:H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞 293AD细胞系相关产品:AHH-1细胞、GC-1spg细胞、UCLA-SO-14细胞 MDA-415细胞系相关产品:HUVEC细胞、Mouse INsulinoma 6细胞、C22 (Clara)细胞 PLA-801D细胞系相关产品:THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞 CA-OV-3细胞系相关产品:HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞 UPCI-SCC-090细胞系相关产品:U20-S细胞、R3/1细胞、OVMANA细胞 Tsup-1细胞系相关产品:CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞 HEK 293T/17细胞系相关产品:SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞 MNNG细胞系相关产品:I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞 4175细胞系相关产品:OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞 Mink细胞系相关产品:ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞 MEC-1细胞系相关产品:HPAF-I细胞、HCC-2935细胞、NCI-H889细胞 NK92细胞系相关产品:HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞 H3255细胞系相关产品:RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞 NCIH2081细胞系相关产品:74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞 NCTC929细胞系相关产品:OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞 NCI-H847细胞系相关产品:Namalwa细胞、NCI-H-128细胞、IPLB-SF 21AE细胞 Co 115细胞系相关产品:COLO829细胞、JHH7细胞、NCIH1688细胞 KGN细胞系相关产品:SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞 MHH-CALL2细胞系相关产品:D-283MED细胞、W133细胞、BE(2)-C细胞 SKRC-52细胞系相关产品:VA-ES-BJ细胞、Ly19细胞、Sci-1细胞 H69细胞系相关产品:KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞 B-cell with DC Morphology细胞系相关产品:SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞 Loucy细胞系相关产品:Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞 SKml2细胞系相关产品:P3/X63-Ag8细胞、C-32细胞、MOLM16细胞 TE-10细胞系相关产品:NGEC细胞、SK-N-BE(2)-C细胞、SUPB-15细胞 M210B4细胞系相关产品:BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞 MDA-MB-134-VI细胞系相关产品:MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞 TE1细胞系相关产品:H-2228细胞、COLO-320HSR细胞、Med 341细胞 Tn 5B1-4细胞系相关产品:H2029细胞、OV1/P细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞 SU 86.86细胞系相关产品:UWB1.289细胞、HEK-293 c18细胞、Hs840_T细胞 NCI-H740细胞系相关产品:LA-N-6细胞、AM细胞、Panc_08_13细胞 NCIH2073细胞系相关产品:BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞 RCC23细胞系相关产品:L 929细胞、BHK-21细胞、HCC-1438细胞 769-P细胞系相关产品:143B细胞、MA 104细胞、RBE细胞 CTV-1细胞系相关产品:P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞 GM00346B细胞系相关产品:ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞 Lung cancer-1/squamous细胞系相关产品:UM-UC-3细胞、QBC-939细胞、H220细胞 BEL-7405细胞系相关产品:H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞 HH [Human lymphoma]细胞系相关产品:NCIH1184细胞、H-1882细胞、C2A细胞 Tn 5B1-4细胞系相关产品:H2029细胞、OV1/P细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞 SK-N-BE(2)-C细胞系相关产品:HOS (TE85)细胞、HCC 2185细胞、PL9细胞 OVCAR-432细胞系相关产品:SK-N-BE细胞、SKMEL24细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞 AR42J细胞系相关产品:COR-L88细胞、TI-73细胞、HeLa S 3细胞 RBE4 epithelioid cells大鼠脑血管内皮细胞系 HT1197细胞系相关产品:190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞 H-847细胞系相关产品:Li-7细胞、Hs 742.T细胞、LA-N-1细胞 DC 2.4细胞系相关产品:526细胞、Kit225-K6细胞、H295R细胞 MM.1S细胞系相关产品:HCC-1419细胞、Tu177细胞、TNC-1B12B4细胞 "
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