PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高转移细胞系

"PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高转移细胞系
细胞背景资料：前列腺癌；男性
细胞形态：上皮细胞样
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
SNU886细胞系相关产品：Huh 7.5细胞、SNU-719细胞、Hu-P-T3细胞
NIHOVCAR3细胞系相关产品：FL62891细胞、H2052细胞、MC-116细胞
KYSE70细胞系相关产品：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
细胞生长：贴壁
PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高转移细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HUASMC细胞系相关产品：HC11细胞、SKLU01细胞、hTERT-HME1细胞
NCIH716细胞系相关产品：GM03573A细胞、3D4/21细胞、AMJ2C8细胞
NCI-H292细胞系相关产品：FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
Jurkat (clone E6-1)细胞系相关产品：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
HT 29细胞系相关产品：TM4细胞、G361-mel细胞、SRA01/04 (HLE)细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高转移细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
ONS76细胞系相关产品：TCam 2细胞、He-La细胞、MG63细胞
SCC9细胞系相关产品：NCI-H2135细胞、CCD-841-CoTr细胞、NIH:OVCAR-10细胞
HIT clone T15细胞系相关产品：NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞
FRhK-4细胞系相关产品：IEC-18细胞、EA hy 926细胞、WEHI-164细胞
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PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高转移细胞系
H1355细胞系相关产品：NBL-3细胞、SN-12C细胞、NCI-H250细胞
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H2106细胞系相关产品：RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞
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NB-9细胞系相关产品：LYR细胞、HEM细胞、HEK-AD 293细胞
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HCC-70细胞系相关产品：Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞
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NCI-H209细胞系相关产品：RA.1细胞、H1693细胞、KBM-7细胞
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