PG13 epithelioid cells逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系

"PG13 epithelioid cells逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
细胞背景资料：胚胎；成纤维细胞
细胞形态：上皮细胞样
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞
KYSE-510细胞系相关产品：OVCAR432细胞、KE37细胞、B78细胞
SW-1222细胞系相关产品：SEG1细胞、GTL 16细胞、RCK-8细胞
细胞生长：贴壁
PG13 epithelioid cells逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDA MB 175 VII细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、H-1623细胞、TO 175.T细胞
NIH:OVCAR-4细胞系相关产品：HTori:3细胞、HLE-B3细胞、ECC-1细胞
MCCAR细胞系相关产品：TGHAVSMC细胞、U266 B1细胞、H1437细胞
SNU601细胞系相关产品：KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞
L 428细胞系相关产品：SNU475细胞、HCC-1833细胞、QGP1细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PG13 epithelioid cells逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
MLFC细胞系相关产品：Murine Carcinoma-38细胞、Karpas422细胞、MM1细胞
RASMC细胞系相关产品：OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
Mv.1.Lu细胞系相关产品：YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
SK-N-DZ细胞系相关产品：A-1847细胞、EC109细胞、BEL 7405细胞
MESSADX5细胞系相关产品：MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
PLC细胞系相关产品：Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品：Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品：F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞
BALL1细胞系相关产品：Wien 133细胞、HEH2细胞、UCLA-SO-M21细胞
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HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞
EoL-1 cell细胞系相关产品：Hs746-T细胞、NGP细胞、143BTK-细胞
HBE 135-E6/E7细胞系相关产品：FHL-124细胞、SCC 9细胞、HPMC细胞
L-02细胞系相关产品：H4IIE细胞、H-2330细胞、ECC 12细胞
SK-N-BE(2)C细胞系相关产品：MDA-MB157细胞、NCI-H64细胞、J-111细胞
NCI-H647细胞系相关产品：HCCLM6细胞、SPC-A-1细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞
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NB-19细胞系相关产品：HREC细胞、PGLH7细胞、F98细胞
SJ-RH30细胞系相关产品：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞
OKT3细胞系相关产品：TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
JVM3细胞系相关产品：NCI-SNU-761细胞、MDA-MB-231细胞、SH-SY5Y细胞
MDA436细胞系相关产品：UMR106细胞、HCE-T细胞、Anip 973细胞
NCIH2405细胞系相关产品：H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
SK-GT-2细胞系相关产品：D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞
Hs-852-T细胞系相关产品：U-343MG细胞、H-295R细胞、ACC2细胞
RPMI1846细胞系相关产品：KYSE50细胞、RSC-96细胞、HASMC细胞
MOLT3细胞系相关产品：NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞
CX1细胞系相关产品：RH7777细胞、SW 1417细胞、H-716细胞
SK HEP-1细胞系相关产品：HEK-293-H细胞、HTR8细胞、HTori 3细胞
U-226AR1细胞系相关产品：H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞
HUCEC细胞系相关产品：RKO细胞、SUD-4细胞、HT-29/CX-1细胞
SNU354细胞系相关产品：NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞
OCI/AML2细胞系相关产品：BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞
OK-WT细胞系相关产品：BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品：SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
Jurkat-77细胞系相关产品：Human fetal lung fibroblast 1细胞、CP-70细胞、686LN-M4e细胞
OE19细胞系相关产品：Panc-10.05细胞、BT 20细胞、DH82细胞
Line 870 Emory University-4细胞系相关产品：CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞
SNU484细胞系相关产品：Hs819T细胞、NCIH64细胞、OV-2008细胞
SK-N-BE(2C)细胞系相关产品：MOLP8细胞、INS1E细胞、LM2-4175细胞
COR L279细胞系相关产品：LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞
QSG-7701细胞系相关产品：SW 626细胞、Y3-Ag1.2.3细胞、RPTC细胞
NK10a细胞系相关产品：HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞
VE细胞系相关产品：GC-2spd(ts)细胞、LM3细胞、EA.Hy926细胞
H-2291细胞系相关产品：SuDHL 4细胞、BCaP-37细胞、HeLa/DDP细胞
BEL-7402细胞系相关产品：5-8F细胞、P-36细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞
C1498细胞系相关产品：EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
C1498细胞系相关产品：EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品：GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
SLK细胞系相关产品：SUM-52-PE细胞、SK_N_BE2C细胞、CAMA细胞
KPL4细胞系相关产品：GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
OVCAR-8/ADR细胞系相关产品：Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞
T1-73细胞系相关产品：PM6细胞、C12细胞、CL MC/9细胞
HRPEpiC细胞系相关产品：HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞
Anip[973]细胞系相关产品：B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
DoTc2细胞系相关产品：Hs 688(A).T细胞、FU-OV-1细胞、MV4:11细胞
HN13细胞系相关产品：16-HBEo细胞、B16 F10细胞、R 1610细胞
SK-MEL-2细胞系相关产品：SNU638细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞、CCD 841 CoN细胞
PMVEC细胞系相关产品：BC3H1细胞、FM-88细胞、RMS1598细胞
HCC-1833细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞
PG13 epithelioid cells逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞系
HSC 3细胞系相关产品：P1-Raji细胞、YES2细胞、SNU368细胞
VE细胞系相关产品：GC-2spd(ts)细胞、ID8细胞、CCD 966 SK细胞
KYSE 140细胞系相关产品：KU19-19细胞、HCC1954-BL细胞、PC3细胞
Mv.1.Lu细胞系相关产品：YAC细胞、YES 2细胞、UWB1-289细胞
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