PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴细胞瘤细胞系

"PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴细胞瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
CSQT-2细胞系相关产品：Blotchy fibroblast-11细胞、COR-L88细胞、BT-474细胞
TALL 1细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-12F细胞、SW837细胞、MPC-5细胞
T/G HA-VSMC细胞系相关产品：OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞
细胞生长：悬浮
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴细胞瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法：１：２传代
K562/ADP细胞系相关产品：SJRH-30细胞、TE-85 clone 5细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞
HNE-3细胞系相关产品：SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
MS-751细胞系相关产品：H-1184细胞、COLO.205细胞、H847细胞
MDA-MB-175VII细胞系相关产品：H-2108细胞、SF767细胞、BNL-HCC细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴细胞瘤细胞系
细胞生长特性：悬浮生长
细胞形态特性：淋巴母细胞
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
CAKI1细胞系相关产品：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
HCC1428细胞系相关产品：P-388细胞、CTLL-2细胞、NR8383.1细胞
Danio rerio Gill细胞系相关产品：SKG-3a细胞、343MG细胞、FHs74Int细胞
PA317细胞系相关产品：R 2 C细胞、Panc04.03细胞、H3396细胞
COS7细胞系相关产品：BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞
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BRL细胞系相关产品：HEK293细胞、LAD 2细胞、Hs 445细胞
32D:cl3细胞系相关产品：Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴细胞瘤细胞系
NT2-D1细胞系相关产品：Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
J82细胞系相关产品：Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞
HCC1954细胞系相关产品：MFE280细胞、A549-Taxol细胞、SKO3细胞
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CWR22Rv1细胞系相关产品：NCI-H2110细胞、Det 562细胞、HME-1细胞
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231-luc细胞系相关产品：BTT739细胞、HCC-2185细胞、RPE1-hTERT细胞
OKa-C-1细胞系相关产品：RPMI-1788细胞、C33细胞、N-87细胞
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PK136细胞系相关产品：NFS60细胞、Vero-76细胞、Institute for Medical Research-90细胞
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MCMEC细胞系相关产品：IB-RS2细胞、HUT28细胞、PC-3/M细胞
HEK;293细胞系相关产品：HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞
HEK 293细胞系相关产品：WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
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COLO 320 HSR细胞系相关产品：DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞
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Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
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C6661细胞系相关产品：MOLP-8细胞、THLE-3细胞、NS1细胞
MX1细胞系相关产品：BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
JTC-28细胞系相关产品：G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞
NCI-H1882细胞系相关产品：HOPC细胞、SEM细胞、SKCO-1细胞
MDCK-II细胞系相关产品：C-Lu-65细胞、MN-60细胞、HCC94细胞
SK-GT-2细胞系相关产品：D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
Fetal Rhesus Kidney-4细胞系相关产品：IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞
REC1细胞系相关产品：MKN-7细胞、HEMCSS细胞、CEM clone 7细胞
Balb/c3T3细胞系相关产品：IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
SW48细胞系相关产品：NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
H446细胞系相关产品：SUIT 2细胞、OV-CA 432细胞、SF 767细胞
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴细胞瘤细胞系
KYSE30细胞系相关产品：MCF7/WT细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、HCA7细胞
LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品：751细胞、BC-024细胞、EA. hy 926细胞
DMS273细胞系相关产品：CF PAC-1细胞、H2591细胞、MILE SVEN1细胞
Danio rerio Gill细胞系相关产品：SKG-3a细胞、HCC-2108细胞、DHL-5细胞
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