"WM266-4 Thawing人黑素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
WM266-4 Thawing人黑素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太高）直接接入，移液器不需完全打到，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好。培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
WM266-4 Thawing人黑素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
有关实验室细胞培养基知识普及：经典的培养基有很多种，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是应用最广泛的培养基。其他如M１９９、IMDM、L１５培养基等也用于某些细胞的培养；MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度；BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的４倍，采用双倍的HCO３-和CO２浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为１０００mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为４５００mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞；Ham’s F１２是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F１２还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养；RPMI １６４０培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
细胞形态特性：详见细胞说明书
MMAc.SF细胞系相关产品：PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞
J82细胞系相关产品：Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞
P3-X63.Ag8.653细胞系相关产品：MonoMac 6细胞、SU-DHL-6细胞、BEL7405细胞
KAT5细胞系相关产品：HTori-3.1细胞、MHH-CALL2细胞、H-1404细胞
Hep2细胞系相关产品：H-660细胞、hFOB1.19细胞、LICR-LON-HN6-R细胞
Rat1细胞系相关产品：INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞
Tokyo Medical and Dental university 8细胞系相关产品：CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞
COLO206细胞系相关产品：NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞
HT1376细胞系相关产品：RH30SJ细胞、RL-65细胞、NK62a细胞
H-2228细胞系相关产品：VB细胞、KE-39细胞、KP-N-RT-BM细胞
MOLT-3细胞系相关产品：HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
P30OHK细胞系相关产品：Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
SW260细胞系相关产品：OVCAR-10细胞、PLMVEC细胞、PG-4(S+L-)细胞
E0771细胞系相关产品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、BC-3-H-I细胞、kms 11细胞
SACCLM细胞系相关产品：HEK 293细胞、TE-10细胞、SW-1990细胞
GM346细胞系相关产品：LN 229细胞、KYSE-410细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞
SF 763细胞系相关产品：GM2131细胞、RD细胞、HT-29细胞
NBLS细胞系相关产品：CEF细胞、RT-BM 1细胞、RK 13细胞
Ly19细胞系相关产品：CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞
Evsa-T细胞系相关产品：PC-9S1细胞、C42细胞、NCI-H1703细胞
CFPAC1细胞系相关产品：PJ34细胞、143B TK-细胞、G-402细胞
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SGC-7901细胞系相关产品：NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞
JTC-39细胞系相关产品：H460细胞、OS-RC-2细胞、MOLT-4细胞
HCT/FU细胞系相关产品：Hs 27细胞、Panc-1-P细胞、HUVSMC细胞
Hs 739.T细胞系相关产品：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞
WM266-4 Thawing人黑素瘤细胞系
SW1116细胞系相关产品：KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞
GM03190细胞系相关产品：H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞
LN-382细胞系相关产品：W256细胞、SVGp12细胞、U-266细胞
bEND.3细胞系相关产品：ATDC5细胞、KP-N-NS细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞
HN-6细胞系相关产品：ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
HCC9204细胞系相关产品：BEL 7402细胞、RKO_AS45细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞
HuH-28细胞系相关产品：MCCAR细胞、Hs934T细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞
SGC-996细胞系相关产品：Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞
NR-8383细胞系相关产品：SU4细胞、NK92细胞、HFL 1细胞
Sp2/O-Ag14细胞系相关产品：MUVEC细胞、SJ-RH30细胞、H-87细胞
CCD841CoN细胞系相关产品：Molm 14细胞、Hep2细胞、Hs742T细胞
HuT 78细胞系相关产品：LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞
Roswell Park Memorial Institute 6666细胞系相关产品：BC-019细胞、UM2细胞、LU-65M细胞
Line 207细胞系相关产品：HCC1806细胞、BC-022细胞、U251-MG细胞
RAG细胞系相关产品：HFTF细胞、OSRC2细胞、CD18细胞
ADR-RES细胞系相关产品：SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞
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Institute for Medical Research-90细胞系相关产品：CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
SKNO-1细胞系相关产品：HEC-151细胞、IEC-18细胞、C32 [Human melanoma]细胞
AtT20细胞系相关产品：U138MG细胞、HS-766T细胞、PA12细胞
Hs445细胞系相关产品：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞
NCI-H165细胞系相关产品：H69C细胞、MC-4细胞、HPF细胞
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MRASMC细胞系相关产品：Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、EC9706细胞、CCD-18Co细胞
OV 1063细胞系相关产品：Pt K2 (NBL-5)细胞、B6Tert-1细胞、RL细胞
CNE-2细胞系相关产品：HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞
GM2132细胞系相关产品：CCD 841 CoTr细胞、H2347细胞、WEHI-3细胞
B16F10细胞系相关产品：CFPAC细胞、SupB15WT细胞、NB1RGB细胞
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Panc-08.13细胞系相关产品：C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞
HCT_116细胞系相关产品：RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞
MX-1细胞系相关产品：HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
WM266-4 Thawing人黑素瘤细胞系
ZR75-30细胞系相关产品：NCI-H1522细胞、SCC VII细胞、HEC1-B细胞
MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
Caki-2细胞系相关产品：SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞
HT144mel细胞系相关产品：MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞
Jijoye细胞系相关产品：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞
WIL2-S细胞系相关产品：COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞
SNU-869细胞系相关产品：P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
BT474细胞系相关产品：H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞
Murine Lung Epithelial-12细胞系相关产品：OCI-LY-10细胞、JEG3细胞、HBVP细胞
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