"B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：B１６-F１０是B１６-F０的亚系。
细胞形态：上皮细胞样
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提高未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞(绝大部分１min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-３细胞)，吹打不超过２０次后(一般１０次即可)，成小规模聚集(１０个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NH6细胞系相关产品：MonoMac6细胞、WERI细胞、HDQ-P1细胞
IGROV-1细胞系相关产品：G361细胞、PC-9/GR细胞、RPE-1细胞
U-87-MG细胞系相关产品：MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
CHO-K1细胞系相关产品：V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
TOV21G细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
RPE-1细胞系相关产品：Human Hepatocyte Line 5细胞、H-1793细胞、HFLS细胞
HCT116细胞系相关产品：Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞
MARC-145细胞系相关产品：MC-26细胞、HUVEC细胞、HOMEC细胞
G292细胞系相关产品：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
P3X63 AG 8.653细胞系相关产品：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞
2V6.11细胞系相关产品：IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
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HCC4006细胞系相关产品：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
OPM2细胞系相关产品：KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
H-2286细胞系相关产品：WERI Rb-1细胞、H2347细胞、CCD19Lu细胞
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MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
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B 95.8细胞系相关产品：NS20Y细胞、KBM5细胞、HFE-145细胞
SJRH-30细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
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Karpas-299细胞系相关产品：HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
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KTC1细胞系相关产品：VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
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B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
87MG细胞系相关产品：BJA-B-1细胞、SK-RC 42细胞、GA10细胞
WEHI-231细胞系相关产品：NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞
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MuM-2C细胞系相关产品：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
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MB49细胞系相关产品：HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞
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