108CC15 小鼠神经母瘤与大鼠胶质瘤之融合细胞系

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细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
108CC15 小鼠神经母瘤与大鼠胶质瘤之融合细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
108CC15 小鼠神经母瘤与大鼠胶质瘤之融合细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
PC 61 5.3细胞系相关产品：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞 
CWR22R-V1细胞系相关产品：HLE-SRA-01/04细胞、NG-108-15细胞、CAL12T细胞 
NCI-A549细胞系相关产品：M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞 
Huh-7.5.1细胞系相关产品：L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞 
SNU-251细胞系相关产品：NSC-34细胞、751-NA-15细胞、CPA 47细胞 
HPB/ALL细胞系相关产品：SP-2/0-AG14细胞、H-1299细胞、HGBEC细胞 
16-HBE细胞系相关产品：MN60细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、IPLB-Sf21-AE细胞 
Merwin Plasma Cell tumor-11细胞系相关产品：PAI细胞、SUM 190细胞、MCF12A细胞 
Hs729T细胞系相关产品：NIHOVCAR3细胞、EJ细胞、MDA361细胞 
T-HEECs细胞系相关产品：QBI-HEK 293A细胞、MV4;11细胞、MDA134细胞 
MXI细胞系相关产品：Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞 
C166细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞 
H69C细胞系相关产品：H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞 
NCIH2107细胞系相关产品：H295R细胞、CD-18细胞、Hs 822.T细胞 
WM-451Lu细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-1666细胞、LN-18细胞 
Walker/LLC-WRC256细胞系相关产品：INS1-E细胞、CL1-0细胞、Vero 76 clone E-6细胞 
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P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品：SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞 
MALME 3M细胞系相关产品：A204细胞、HaCaT细胞、MDCK II细胞 
HEMCSS细胞系相关产品：STTG1细胞、SKCO 1细胞、RL95细胞 
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MPVECs细胞系相关产品：WM 239A细胞、PL-9细胞、Hs819.T细胞 
UM-UC3细胞系相关产品：HEC1A细胞、H1299细胞、HD-LM-2细胞 
U-2932细胞系相关产品：Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞 
BHK-21细胞系相关产品：QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞 
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞系相关产品：HS940细胞、S.B.细胞、Ca761细胞 
LN-382细胞系相关产品：W256细胞、SVGp12细胞、U-266细胞 
Z-138细胞系相关产品：H838细胞、LNCaP-FGC细胞、D283 Med细胞 
ATN1细胞系相关产品：NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞 
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞 
BV2细胞系相关产品：KYSE 520细胞、HCC-2108细胞、SKG3A细胞 
BEAS-2B细胞系相关产品：PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞 
AML-12细胞系相关产品：HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞 
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞 
786-0WT细胞系相关产品：PATU-S细胞、BXPC3细胞、TW 01细胞 
OV-2008细胞系相关产品：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞 
Y-79细胞系相关产品：MBT2细胞、DITNC1细胞、CX-1细胞 
SK-BR3细胞系相关产品：MKN-74细胞、DMS-114细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞 
CHL细胞系相关产品：Panc-03.27细胞、MALME.3M细胞、SUDHL-8细胞 
Detroit562细胞系相关产品：NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞 
VMCUB1细胞系相关产品：H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞 
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品：IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞 
HSKMC细胞系相关产品：C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞 
MOLT 16细胞系相关产品：R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞 
Balb/c 3T3细胞系相关产品：ACCM细胞、NRK细胞、TOV-21G细胞 
P3X63细胞系相关产品：GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞 
Hepatoma-22细胞系相关产品：NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞 
H-460细胞系相关产品：GLC-82细胞、RT-4细胞、B16F0细胞 
H747细胞系相关产品：SUD-4细胞、MDA MB 231细胞、SUM-52PE细胞 
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品：SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞 
Madin-Darby Canine Kidney细胞系相关产品：U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞 
LK 2细胞系相关产品：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞 
697细胞系相关产品：NUGC3细胞、CCD 841 CoN细胞、NCI-H841细胞 
Panc 4.03细胞系相关产品：WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞 
293 H细胞系相关产品：RGC5细胞、NCI-H2291细胞、H-125细胞 
HCCLM3细胞系相关产品：HAEC细胞、Panc_03_27细胞、EB-3细胞 
DSL6A/C1细胞系相关产品：HSC-4细胞、SW 900细胞、LK-2细胞 
OCM-1A细胞系相关产品：A.704细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、OCILY3细胞 
AK细胞系相关产品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、HGMC细胞、TE-13细胞 
7404细胞系相关产品：4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞 
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞 
CEMx721.174.T2细胞系相关产品：Tn5B1-4细胞、TE-13细胞、2BS细胞 
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Nthy-ori 3.1细胞系相关产品：CL 1-5细胞、LLC-PK(1)细胞、IPEC1细胞 
HL60细胞系相关产品：MT-3 [Human leukocytes]细胞、Farage细胞、MDA MB 436细胞 
HC-11细胞系相关产品：Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞 
4-1st细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞 
FTC-133细胞系相关产品：SNU-C1细胞、SNU-251细胞、NSC34细胞 
L428细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、MCF-7/AdrR细胞、H82细胞 
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞 
IHH细胞系相关产品：HS5细胞、Jurkat-E6细胞、LPC-H12细胞 
MDCK-2细胞系相关产品：Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞 
KMH-2细胞系相关产品：OCI-Ly1细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、EAhy926细胞 
SUDHL8细胞系相关产品：OCI Ly19细胞、MOLT 3细胞、MDA 1386细胞 
NCI-A549细胞系相关产品：M14-MEL细胞、C-33-A细胞、Metastatic Variant 522细胞 
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