EPC 大鼠血管内皮祖细胞系

"EPC 大鼠血管内皮祖细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
EPC 大鼠血管内皮祖细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
EPC 大鼠血管内皮祖细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
HEK AD293细胞系相关产品：P3-X63.Ag8.653细胞、C918细胞、SF-767细胞 
NCI-H676B细胞系相关产品：J82细胞、CPAE细胞、A-427细胞 
A549/DDP细胞系相关产品：NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞 
HEL-299细胞系相关产品：EoL-1细胞、TE3A细胞、NCIH810细胞 
H-146细胞系相关产品：HCC-1359细胞、H64细胞、KALS1细胞 
SK-NMC细胞系相关产品：Swiss 3T6细胞、PAI细胞、MAEC细胞 
OCI-Ly07细胞系相关产品：MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞 
P30/0HK细胞系相关产品：UMUC3细胞、H2107细胞、293 Ad5细胞 
X63-Ag8细胞系相关产品：H187细胞、SW 1783细胞、H1930细胞 
X63-Ag 8.6.5.3细胞系相关产品：MX1细胞、FRH-0201细胞、H-1581细胞 
EOC-20细胞系相关产品：SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞 
SK-N-BE(2)-C细胞系相关产品：HOS (TE85)细胞、HCC 2185细胞、PL9细胞 
PFSK细胞系相关产品：NCI H548细胞、RAW264细胞、SUSM-1细胞 
bEND.3细胞系相关产品：ATDC5细胞、KP-N-NS细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞 
U-87MG ATCC细胞系相关产品：BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞 
SU-DHL1细胞系相关产品：Hs695细胞、HEC1B细胞、Mono-Mac-6细胞 
SU-DHL1细胞系相关产品：Hs695细胞、HEC1B细胞、Mono-Mac-6细胞 
Plaepi 34细胞系相关产品：MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞 
LLC-PK-1细胞系相关产品：KHYG细胞、INS-1细胞、HEK293EBNA细胞 
EoL-1细胞系相关产品：MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞 
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Rainbow Trout Embryo细胞系相关产品：SupB15W细胞、BOWES细胞、TOG细胞 
RKO_AS45细胞系相关产品：NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞 
B16 melanoma F10细胞系相关产品：NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞 
H3396细胞系相关产品：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞 
HT-144细胞系相关产品：RMC-1细胞、SU-DH-L5细胞、Line 522细胞 
MEC1细胞系相关产品：J 111细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、SK Col 1细胞 
F36P细胞系相关产品：MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞 
RBE4细胞系相关产品：B95-8细胞、MCF-12F细胞、NCIH522细胞 
MDA.MB.435细胞系相关产品：B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞 
OsACL细胞系相关产品：Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、LU65细胞、SUM-159-PT细胞 
SW480E细胞系相关产品：MDA-361细胞、NCI-H650细胞、SU-DH-L5细胞 
Jijoye细胞系相关产品：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞 
NCI-H1819细胞系相关产品：NCIH2110细胞、KYSE 510细胞、CNE1细胞 
LUDLU-1细胞系相关产品：HOP62细胞、SY5Y细胞、NCIH1734细胞 
CEMC1细胞系相关产品：DK-MG细胞、H9c2 (2-1)细胞、MDCK.2细胞 
H4-IIE-C3细胞系相关产品：CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞 
TW 01细胞系相关产品：A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞 
Bowes melanoma cells细胞系相关产品：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞 
BDCM细胞系相关产品：OCI/AML2细胞、Plaepi 34细胞、SUIT-2细胞 
HSAS4细胞系相关产品：A 2058细胞、C8166细胞、MDA-MB-134VI细胞 
DHL-4细胞系相关产品：NTHY-ORI3.1细胞、Panc-813细胞、H2110细胞 
Hx-147细胞系相关产品：PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞 
H1435细胞系相关产品：Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞 
SCL-1细胞系相关产品：MDA-MB-175-VII细胞、SO-RB50细胞、NCI-H1581细胞 
HD11细胞系相关产品：GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞 
H-2081细胞系相关产品：PK 15细胞、NuTu-19细胞、HCC-1569细胞 
NCI-H2342细胞系相关产品：174xCEM.T2细胞、NCIH889细胞、hEEC细胞 
MOVAS细胞系相关产品：SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞 
RCC-10细胞系相关产品：SKCO-1细胞、OCI-Ly 18细胞、NCIH1355细胞 
DV-90细胞系相关产品：Eca-109细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞、Duck embryo细胞 
MCF-7细胞系相关产品：MONO-MAC 6细胞、NCIH1436细胞、LS 513细胞 
OCI-LY-1细胞系相关产品：Hs 445细胞、L6细胞、SMMC7721细胞 
SK N SH细胞系相关产品：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞 
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞 
5-8F细胞系相关产品：Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞 
SJRH30细胞系相关产品：HMEL细胞、SKOV3细胞、WEHI 164 TC细胞 
WISH细胞系相关产品：OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞 
7404细胞系相关产品：4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞 
SK-MEL 28细胞系相关产品：NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞 
HSC-4细胞系相关产品：RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞 
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞 
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NIH 3T3细胞系相关产品：AR42J细胞、KYSE-150细胞、RPMI-2650细胞 
LC-MS细胞系相关产品：NCIH1963细胞、SNU601细胞、NCI-H2170细胞 
NIH-3T3-L1细胞系相关产品：Sup T-1细胞、B4G12细胞、RM1细胞 
SK ES 01细胞系相关产品：MKN45细胞、PSN-1细胞、NCI-H1385细胞 
Leukemic 1210细胞系相关产品：NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞 
ECC1细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 24细胞、GM-3573细胞、DKMG细胞 
GA-10 clone 4细胞系相关产品：P388.D1细胞、Hs 636 T细胞、SNU-869细胞 
RS4:11细胞系相关产品：PC-3/M细胞、Ramos (RA 1)细胞、COLO-394细胞 
OVCA432细胞系相关产品：KU 19-19细胞、REC-1细胞、H-838细胞 
KMS-18细胞系相关产品：MALME.3M细胞、343 MG细胞、GM637细胞 
NCI-H1355细胞系相关产品：NCI-H1618细胞、AML 12细胞、BE2-M17细胞 
A549/DDP细胞系相关产品：NCI-H2029细胞、G361细胞、Z310细胞 
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