NCI-H1882细胞：人肺癌细胞系

"NCI-H1882细胞：人肺癌细胞系

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

细胞生长：贴壁

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

公司主营ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学来源细胞系及原代细胞，全程提供细胞系背景、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件、传代方法等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！公司由在国外工作和学习多年的留学人员创办，由国内中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所，复旦大学，同济大学等多名工作在线的细胞培养专家，提供细胞培养技术支持。公司依靠自身一些的技术和理念，以世界一流的技术支撑阵容，提供一系列细胞相关的技术服务。为中国的生命科学事业赶超欧美，提供了重要的基石；公司将依靠自主研究开发的高技术高质量和有绝对的价格竞争力的产品，立足国内，面向世界。力争打破国外大公司在细胞培养科学领域接近垄断的地位，为中国在生命科学的这一领域一席之地。公司筹划未来三年内，在沈阳、济南、北京、西安、宁夏、武汉、等国内代表城市建立细胞培养分实验室，以便更好的服务国内广大医院、大学、制药企业等，你们的每一份关心和支持，都是我们前进的动力！

冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。

细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。

CV-1.K细胞系相关产品：OVMANA细胞、Ku812F细胞、RH8994细胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

细胞系相关产品：NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞

Human Microglia Clone 3细胞系相关产品：HCC2108细胞、SCL2细胞、32Dcl3细胞

SU86.86细胞系相关产品：NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞

HEY A8细胞系相关产品：ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞

VP303细胞系相关产品：Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞

RT4细胞系相关产品：U-118-MG细胞、OLN 93细胞、SVOG细胞

HCC1500细胞系相关产品：OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞

NP69细胞系相关产品：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞

LAD2细胞系相关产品：IPEC-1细胞、RGB细胞、WERIRb1细胞

NCIH510细胞系相关产品：N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞

HuH7细胞系相关产品：CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞

OCI-Ly01细胞系相关产品：Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞

KRC-Y细胞系相关产品：Human Foreskin Fibroblast细胞、EAC细胞、Y3M细胞

hs 68细胞系相关产品：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞

NHEK细胞系相关产品：MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞

NHEK细胞系相关产品：MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞

PNT1A细胞系相关产品：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞

NFS-60细胞系相关产品：Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞

H-748细胞系相关产品：Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞

INS1E细胞系相关产品：HEC1B细胞、KTCTL140细胞、HEK 293T/17细胞

Sp 2817细胞系相关产品：RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞

IOSE 29细胞系相关产品：293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞

Panc-1-P细胞系相关产品：NCI-H460细胞、GM03570E细胞、PLA801-95D细胞

766T细胞系相关产品：EnCa1细胞、ABC-1细胞、RS4-11细胞

HEC-1A细胞系相关产品：Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞

MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品：P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞

VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞

MCF.10A细胞系相关产品：HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞

VM-CUB-1细胞系相关产品：BT-483细胞、SF-126细胞、AU565细胞

H-1672细胞系相关产品：PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞

HCT/Taxo1细胞系相关产品：NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞

MMAc.SF细胞系相关产品：PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞

Mo 59J细胞系相关产品：GA-10 clone 4细胞、HuTu 80细胞、Ca759细胞

Hs 739.T细胞系相关产品：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞

X63-Ag8细胞系相关产品：H187细胞、SW 1783细胞、H1930细胞

IALM细胞系相关产品：DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞

SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞

NCI-H211细胞系相关产品：H22细胞、JG细胞、P3 (Jiyoye)细胞

GM15452细胞系相关产品：Hs 343.T细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、COLO 320细胞

P3-X63Ag8细胞系相关产品：HCC 2185细胞、Reuber H35细胞、H460细胞

CNE-2Z细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞

UMUC14细胞系相关产品：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞

NB4细胞系相关产品：Hep G2细胞、H524细胞、COR-L105细胞

NCI-H1694细胞系相关产品：H1048细胞、OKAC1细胞、NCI-H441细胞

COR-L51细胞系相关产品：C26细胞、MC/9细胞、LM8细胞

PG-4(S+L-)细胞系相关产品：F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞

KP-N-RT-BM细胞系相关产品：HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞

TM3细胞系相关产品：HRCEC细胞、NS653细胞、HSC-1细胞

SNU668细胞系相关产品：Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞

RPVSMC细胞系相关产品：SUM-149细胞、NCI-H1651细胞、NCIH1975细胞

P3HRI细胞系相关产品：SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞

KMS26细胞系相关产品：Kuramochi细胞、NCI-441细胞、3T3 Swiss Albino细胞

HC11细胞系相关产品：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞

FLS细胞系相关产品：Hs68细胞、PC10细胞、SNU484细胞

GI-1细胞系相关产品：SUDHL-10细胞、SW-1088细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞

KYSE0410细胞系相关产品：H929细胞、GTL-16细胞、SKG-IIIa细胞

Institute for Medical Research-90细胞系相关产品：CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞

F98细胞系相关产品：MC-CAR细胞、YES 2细胞、YAC-1细胞

Hs 934.T细胞系相关产品：MV4-11细胞、NCIH2030细胞、G 401细胞

Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品：H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞

RBL-I细胞系相关产品：PFSK1细胞、B16细胞、Institute for Medical Research-32细胞

KYSE-410细胞系相关产品：TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞

LU165细胞系相关产品：WIL2-S细胞、hMSC-BM细胞、HCT 116细胞

SNU407细胞系相关产品：NCI-BL6细胞、SNU251细胞、OVCAR.4细胞

NTHY-ORI3.1细胞系相关产品：hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞

NCIH1385细胞系相关产品：P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞

HT-1080细胞系相关产品：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞

NCI-H2029细胞系相关产品：Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞

CFPAC细胞系相关产品：NCIH524细胞、HEL9217细胞、DMS-153细胞

HNTEC细胞系相关产品：MES-SA细胞、H1648细胞、KLN205细胞

HEL-92_1_7细胞系相关产品：SKG-IIIa细胞、NCI H157细胞、SCC-15细胞

Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品：Jeko1细胞、J-774A.1细胞、SNU-520细胞

HeLa 229细胞系相关产品：HepG2/C3A细胞、LS174细胞、RCC-4细胞

"