PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称:乙型肝炎病毒PCR检测试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2761
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human ACSM5 ELISA KitHuman PADI2(Protein-arginine deiminase type-2) ELISA Kit橙皮苷 细胞P35蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human ACD ELISA KitHuman GFM1(Elongation factor G, mitochondrial) ELISA Kit4-羟基-6-甲基-2-吡喃酮载玻片细胞P35蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human AFAP1 ELISA KitHuman FGF20(Fibroblast growth factor 20) ELISA Kit4-羟基-6-甲基-2-吡喃酮冰冻切片组织P35蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human ACBD3 ELISA KitHuman PRKAA1(5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-1) ELISA Kit盐酸联氨石蜡切片组织P35蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human PAP(Prostatic acid phosphatase) ELISA KitHuman HAS1(Hyaluronan synthase 1) ELISA Kitα-己基肉桂醛 载玻片细胞P35蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human ACO2(Aconitase 2) ELISA KitHuman HDLBP(Vigilin) ELISA Kitα-己基肉桂醛 冰冻切片组织P35蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human ACADSB ELISA KitHuman JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1) ELISA Kit1H,1H,2H,2H-全氟辛基三氯硅烷 石蜡切片组织P35蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human ACAP1 ELISA KitHuman LMAN1(Protein ERGIC-53) ELISA Kit1H,1H,2H,2H-全氟辛基三氯硅烷 细胞P35蛋白表达比色法定量检测试剂盒
乙型肝炎病毒PCR检测试剂盒低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9检测试剂盒10mg2-溴噻唑HPLC98%100mLLMP7/PSMB9 ELISA KitHPLC98%低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9检测试剂盒10mgNEP125mgCAS号:BL21(DE3) 感受态细胞 18883-66-4155801-00-696T角蛋白18(KRT18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9检测试剂盒10mgNEP高端化学试剂Dachsous 1蛋白(DCHS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:BL21(DE3)感受态细胞 18883-66-496T细胞外基质酸糖蛋白(MEPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%登革热抗体IgM检测试剂盒10mgTU M2-PK高端化学试剂D2-羟基戊二酸二乙酯脱氢酶(D2HGDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
登革热抗体IgM检测试剂盒10mg2-溴噻唑HPLC98%100mLdengue fever antibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kitHPLC98%登革热抗体IgM检测试剂盒10mgTU M2-PK25mgCAS号:BL21(DE3)感受态细胞 18883-66-496T细胞外基质酸糖蛋白(MEPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%登革热抗体IgM检测试剂盒10mgTU M2-PK高端化学试剂D2-羟基戊二酸二乙酯脱氢酶(D2HGDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:BL21(DE3)pLysS受体菌64-75-5155521-46-396T周期素依赖性激酶4(CDK4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%登革热抗体检测试剂盒10mgCA724高端化学试剂糖磺基转移酶14(CHST14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
登革热抗体检测试剂盒10mg5-溴噻唑HPLC98%100mLdengue fever antibody,DF-Ab ELISA KitHPLC98%登革热抗体检测试剂盒10mgCA724200mgCAS号:BL21(DE3)pLysS受体菌64-75-5155521-46-396T周期素依赖性激酶4(CDK4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%登革热抗体检测试剂盒10mgCA724高端化学试剂糖磺基转移酶14(CHST14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:BL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-520380-11-496T杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%登革热检测试剂盒20mgCTA高端化学试剂Cystin 1蛋白(CYS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
登革热检测试剂盒20mg5-溴噻唑HPLC98%100mLDF IgG ELISA kitHPLC98%登革热检测试剂盒20mgCTA200mgCAS号:BL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-520380-11-496T杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%登革热检测试剂盒20mgCTA高端化学试剂Cystin 1蛋白(CYS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:BL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-573493-60-496T蕈碱型胆碱受体M5(CHRM5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%的牛血清白蛋白检测试剂盒10mgTNF-α高端化学试剂Cylicin 2蛋白(CYLC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
的牛血清白蛋白检测试剂盒10mg5-溴噻唑HPLC98%100mLbovine serum albumin,BSA ELISA kitHPLC98%的牛血清白蛋白检测试剂盒10mgTNF-α200mgCAS号:BL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-573493-60-496T蕈碱型胆碱受体M5(CHRM5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%的牛血清白蛋白检测试剂盒10mgTNF-α高端化学试剂Cylicin 2蛋白(CYLC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:X-gal(20mg/mL)64-75-5943989-68-296T纤溶酶原(Plg)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白质二键异构酶检测试剂盒20mgTNFAIP6高端化学试剂Cylicin 1蛋白(CYLC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
蛋白质二键异构酶检测试剂盒20mg3-巯基丙酸异辛酯HPLC98%100mLprotein disulfide isomerase,PDI ELISA KitHPLC98%蛋白质二键异构酶检测试剂盒20mgTNFAIP615mgCAS号:X-gal(20mg/mL)64-75-5943989-68-296T纤溶酶原(Plg)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白质二键异构酶检测试剂盒20mgTNFAIP6高端化学试剂Cylicin 1蛋白(CYLC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1.2ml×3ampulesCAS号:X-gal(20mg/mL)60-54-873815-15-396T纤维蛋白肽A(FPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白脂质蛋白抗体检测试剂盒10mgTACE;ADAM17高端化学试剂皮质素1(CTXN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
蛋白脂质蛋白抗体检测试剂盒10mg苄氧乙酸HPLC98%100mLproteolipid protein,PLP ELISA KitHPLC98%蛋白脂质蛋白抗体检测试剂盒10mgTACE;ADAM171.2ml×3ampulesCAS号:X-gal(20mg/mL)60-54-873815-15-396T纤维蛋白肽A(FPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白脂质蛋白抗体检测试剂盒10mgTACE;ADAM17高端化学试剂皮质素1(CTXN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号:缓冲蛋白胨水(BPW)60-54-859282-55-296T酰化刺激蛋白(ASP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白水解诱导因子/皮离蛋白检测试剂盒10mgTNF-β高端化学试剂CTD酸酶1(CTDP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
蛋白水解诱导因子/皮离蛋白检测试剂盒10mg苄氧乙酸HPLC98%100mLPIF/DCD ELISA KitHPLC98%蛋白水解诱导因子/皮离蛋白检测试剂盒10mgTNF-β500mgCAS号:缓冲蛋白胨水(BPW)60-54-859282-55-296T酰化刺激蛋白(ASP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白水解诱导因子/皮离蛋白检测试剂盒10mgTNF-β高端化学试剂CTD酸酶1(CTDP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号:大豆蛋白胨60-54-8358748-29-596T角蛋白19(KRT19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白酶体检测试剂盒10mgTNF-γ高端化学试剂二-N-乙酰壳二糖酶(CTBS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
蛋白酶体检测试剂盒10mg1H,1H,2H-全氟-1-十二烯HPLC98%100mLPSMB2 ELISA kitHPLC98%蛋白酶体检测试剂盒10mgTNF-γ10mgCAS号:大豆蛋白胨60-54-8358748-29-596T角蛋白19(KRT19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白酶体检测试剂盒10mgTNF-γ高端化学试剂二-N-乙酰壳二糖酶(CTBS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1gCAS号:大豆分离蛋白60-54-8547-65-996T角蛋白20(KRT20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC95%蛋白酶体检测试剂盒20mgTNFsR-Ⅰ高端化学试剂癌/睾丸抗原2(CTAG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
蛋白酶体检测试剂盒20mg乙烯基磺酸钠GC95%100mLPSMB1 ELISA kitGC95%蛋白酶体检测试剂盒20mgTNFsR-Ⅰ1gCAS号:大豆分离蛋白60-54-8547-65-996T角蛋白20(KRT20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC95%蛋白酶体检测试剂盒20mgTNFsR-Ⅰ高端化学试剂癌/睾丸抗原2(CTAG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号:多价蛋白胨104376-79-6700-57-296TKruppel样因子4(KLF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%蛋白酶激活复合体亚基2检测试剂盒20mgTNFsR-Ⅱ9007-49-2高端化学试剂半胱氨酸蛋白酶抑制剂2(CST2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
关键字: 乙型肝炎病毒;PCR检测试剂盒;50T;FSP2761;
上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。
上海抚生实业有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
公司秉承“专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!
公司售后服务宗旨:有质量问题可申请退换,有技术疑问可随时给于解答,一对一的客服服务,客户的需求也是我们不断的更新服务。