L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织复苏细胞(附STR鉴定报告)

"L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织复苏细胞(附STR鉴定报告)

细胞生长：贴壁

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞培养中的污染分为两类，化学污染和生物污染。化学污染是一些对细胞有毒性的或对细胞产生刺激的化学物质。这些污染一般来自于没有洗净的器皿、不纯的化学试剂和质量较差的蒸馏水等。化学污染中比较引人注意的是细菌内毒素。它是革兰氏阴性细菌细胞死亡后解体释放出的疏水性的细胞壁组成物质，对塑料等疏水性强的物质有很强的吸附能力。细菌内毒素可刺激部分细胞产生一些激素或细胞因子，对细胞生长和实验结果产生影响。细菌内毒素是临床上的主要的热原（即注射到动物体内会导致动物发热），所以通过细胞培养生产的疫苗、细胞因子等用在临床上的药品的生产过程中更是要避免细菌内毒素的污染。

HEK293-H细胞类似产品：：SKNMC细胞、OCI AML4细胞、U87MG细胞

Normal Rat Kidney细胞类似产品：：526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织复苏细胞(附STR鉴定报告)

在使用胰酶细胞消化液的过程中要别注意避免消化液被细菌污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化：吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清；加入少量胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟（不同的细胞消化时间有所不同）；显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状；或者用枪吹打细胞发现细胞刚HAO可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞外基质）水解，改变细胞间的连接，使组织或细胞片分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织复苏细胞(附STR鉴定报告)

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

RFL 6细胞类似产品：：BT 325细胞、HEC1-A细胞、SUM52细胞

Kelly细胞类似产品：：OSC19细胞、CHL-IU细胞、CCD-1095Sk细胞

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CAL851细胞类似产品：：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

用T25培养瓶复苏细胞：新的T25瓶1个，含8ml完全培养液；冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水1-2min，待完全溶解（观察冻存管内没有冰晶时）后尽快移入安全柜复苏；用无菌吸管吸取溶解液轻打入新制 T25 瓶中，顺时针摇匀；放入相应培养条件的培养箱中，过夜换液，2-4天长满。（具体参考细胞倍增时间）；10cm培养皿复苏细胞：新10cm培养皿1个，含12mL完全培养液；冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴1-2min，待完全溶（观察冻存管内没有冰晶时）后尽快移入安全柜复苏；用无菌吸管吸取溶解液轻打入新制平皿中，顺时针摇匀；放入相应培养条件的培养箱中，过夜换液，2-4天长满。（具体以细胞周期为准），细胞复苏注意问题：复苏过程应迅速操作，时间不能太长，复苏过程中注意操作，防止污染，细胞复苏去除DMSO，不同的细胞对DMSO敏感度不同，根据细胞性选择是否离心，大多数细胞是复苏后，第天换液去除DMSO，避免刚复苏细胞受离心造成的机械损伤。

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

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