5-8F Cells(赠送Str鉴定报告)|鼻咽癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。

细胞生长：贴壁

Epstein-Barr-3细胞类似产品：：SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞

T/G HA-VSMC细胞类似产品：：OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞

MT-4细胞类似产品：：HPAC细胞、PANC0813细胞、BBE细胞

HOEC细胞类似产品：：HT(H9)细胞、GDM1细胞、EA. hy 926细胞

SACC-83细胞类似产品：：LM-TK-细胞、SGC996细胞、HCC-38细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２传代

GL261细胞类似产品：：GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞

SK Mel 24细胞类似产品：：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞

AAV-293细胞类似产品：：P19细胞、A1847细胞、HECV细胞

NTera 2细胞类似产品：：N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞

VERO C 1008细胞类似产品：：IMCD3细胞、FDCP-1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长　

RPMI 8226细胞类似产品：：LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞

RBSMC细胞类似产品：：LNCaP-C4-2细胞、MDA MB231细胞、HFT 8810细胞

OAW42细胞类似产品：：EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞

HSC6细胞类似产品：：HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞

Rabbit Kidney 13细胞类似产品：：NCIH1650细胞、A2780CP70细胞、SK-N-BE2C细胞

HRIF细胞类似产品：：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

VMRC-LCD细胞类似产品：：M059K细胞、NBL-S细胞、NCI-H1522细胞

LAN-1细胞类似产品：：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞

SK-N-BE2C细胞类似产品：：MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞

A549/DDP细胞类似产品：：NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞

U-251MG细胞类似产品：：SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞类似产品：：Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞

COLO320DM细胞类似产品：：GC-1spg细胞、HFF细胞、HEL 92.1.7细胞

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V 79-4细胞类似产品：：FHs 74 Int细胞、K 562细胞、AU-565细胞

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R-1059-D细胞类似产品：：DanG细胞、C41细胞、RBL-1细胞

HB 611细胞类似产品：：RPMI #1846细胞、CAL12T细胞、H2405细胞

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118MG细胞类似产品：：SUP-B1细胞、Detroit 562细胞、LM1细胞

D-341Med细胞类似产品：：MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞

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Cloudman M3细胞类似产品：：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞

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Normal fibroblast-10细胞类似产品：：58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞

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L-6细胞类似产品：：L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞

QBI-293A细胞类似产品：：G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞

TE32细胞类似产品：：NIH-3T3细胞、LC1-Sq细胞、MDA-MB-415细胞

LL2细胞类似产品：：UMNSAH-DF 1细胞、HL-60细胞、SW 1116细胞

MDA-MB-435S细胞类似产品：：Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞

A375细胞类似产品：：LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞

Caco 2细胞类似产品：：HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞

NPA 87细胞类似产品：：L-6TG细胞、32Dcl3细胞、Swiss 3T3细胞

EBTr细胞类似产品：：RWPE2细胞、U-251MG细胞、RBL.2H3细胞

SF-539 BT细胞类似产品：：SCL1细胞、IMCD3细胞、HEI-193细胞

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