组织总RNA小量提取试剂盒
| 中文名称 | 组织总RNA小量提取试剂盒 |
|---|---|
| 中文同义词 | 组织总RNA小量提取试剂盒 |
| 英文名称 | Tissue total RNA extraction kit |
| 英文同义词 | |
| CAS号 | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS号 | |
| 相关类别 | RNA提取 |
| Mol文件 | Mol File |
| 结构式 |
组织总RNA小量提取试剂盒 性质
高纯度：OD 260/280:1.9-2.1。 安全使用：无需酚/氯仿抽提。 节约时间：40-60分钟（取决于样品的类型）可从25mg的动物组织中纯化出RNA。组织总RNA小量提取试剂盒用于动物组织，细胞，老鼠尾巴，石蜡包埋组织基因组DNA提取，硅胶膜纯化技术，限度去除蛋白质，多糖，脂类等杂质，纯度高，整个提取过程无需乙醇沉淀和酚/氯仿抽提。1.将组织在液氮中磨碎成粉沫。每20~30mg组织加600ulBufferRL（使用前检查是否加入β-巯基乙醇），组织样本少于20mg加350ulBufferRL。样品体积不超过BufferRL体积的十分之一。
2.样品充分裂解后，室温放置5min，使蛋白核酸复合物完全分离。
3.12000rpm离心2~5min，取上清进行下步操作。
4.加入1倍体积（600ul或350ul）的70%乙醇（无RNase水配制），混匀。
5.将步骤4所得溶液全部加入到已装入收集管（CollectionTube2ml）的吸附柱（SpinColumnCR）中，若一次不能将全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
6.向吸附柱中加入350μlBufferRD，10000rpm离心15sec，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7.配制DNaseI混合液：取52ulDEPC-H2O，向其中加入8ul10×DNaseIBuffer和20ulDNaseI（1U/ul），混匀，配制成终体积为80ul的DNaseI混合液。
8.向吸附柱中直接加入80ulDNaseI混合液，20~30℃孵育15min。
9.向吸附柱中加入350ulBufferRD，10000rpm离心15sec，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10.向吸附柱中加入500ulBufferRW，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
11.重复步骤10。
12.12000rpm离心2min，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
13.将吸附柱置于一个新的无RNase离心管（CollectionTube1.5ml）中，向吸附柱的中间部位悬空加入30~50ulDEPC-H2O，室温放置1min，12000rpm离心1min，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。