质粒大量提取试剂盒
质粒大量提取试剂盒 性质
质粒大量提取试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，操作简单方便，1 h内可完成单个样本的抽提工作。离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
高拷贝质粒推荐使用量150-300 mL，得率可多达0.2-1.5 mg左右；低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒，应适当加大菌体量。质粒大量提取试剂盒的应用范围：
1.50~150 ml或以上菌液的质粒提取；
2.可使用于酶切、测序等一般工作中；
3.适用于细胞转染等特定工作；
4.可应用于动物体内实验。
质粒大量提取试剂盒使用时需注意：
1.所有离心操作步骤，均在室温（15-25℃）下进行。
2.首次使用时，将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后（终浓度100 μg/mL）置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
3.首次使用前请先在漂洗液WB瓶中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入无水乙醇，以免多次加入！
4.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热帮助溶解，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫
5.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。