碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

中文名称碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
中文同义词碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
英文名称Alkaline phosphatase staining solution (azo coupling method)
英文同义词
CAS号
分子式
分子量0
EINECS号
相关类别
Mol文件Mol File
结构式碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 结构式

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 性质

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 用途与合成方法

碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),其原理是在pH9.2~9.8的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸不萘酚,后者不偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨,结果较金属盐沉淀法可靠。

一、涂片或切片
1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蜡切片无需固定),水洗。
2、滴加配制好的碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法),放入湿盒中,避光孵育15~20min,水洗。
3、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3~5min。
4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。
二、贴壁培养细胞
1、取6孔板或其他容器培养的细胞,弃液,PBS清洗干净
2、加入碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)固定3min或4%多聚甲醛固定10~15min,PBS清洗。
3、滴加配制好的碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法),放入湿盒中,避光孵育15~20min,PBS清洗。
4、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3~5min。
5、PBS清洗、镜检。

ALP活性部位蓝色
细胞核红色(核固红)或绿色(甲基绿)
血液、骨髓涂片

1.血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2.培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。
3.ALP孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
4.复染时,核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。
5.每次染色时,应有阳性对照片。

安全信息

MSDS信息

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 上下游产品信息

Tag:碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
主页 | 企业会员服务 | 广告业务 | 联系我们 | 旧版入口 | 中文MSDS | CAS Index | 常用化学品CAS列表 | 化工产品目录 | 新产品列表 | 评选活动 | HS海关编码 | MSDS查询 | 化工站点

Copyright © 2016-2023 ChemicalBook 版权所有  京ICP备07040585号  京公海网安备11010802032676号  

互联网增值电信业务经营许可证:京ICP证150597号  互联网药品信息服务资格证编号(京)-非经营性-2015-0073  信息系统安全等级保护备案证明(三级)  营业执照公示

根据相关法律法规和本站规定,单位或个人购买相关危险物品应取得有效的资质、资格条件。
参考《应急管理部等多部门关于加强互联网销售危险化学品安全管理的通知 (应急〔2022〕119号)》《互联网危险物品信息发布管理规定》