3-磷酸甘油醛脱氢酶
中文名称 | 3-磷酸甘油醛脱氢酶 |
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中文同义词 | 甘油醛-3-磷酸脱氢酶;3-磷酸甘油醛脱氢酶;甘油醛-3-磷酸脱氢酶 来源于鸡肌肉;D-甘油醛-3-磷酸:NAD+ 氧化还原酶(磷酸化);甘油醛-3-磷酸脱氢酶 来源于兔肌肉;甘油醛-3-磷酸脱氢酶 来源于面包酵母(酿酒酵母);甘油醛-3-磷酸脱氢酶 来源于人类红细胞;甘油醛-磷酸脱氢酶 |
英文名称 | GLYCERALDEHYDE-3-PHOSPHATE DEHYDROGENASE |
英文同义词 | D-GLYCERALDEHYDE 3-PHOSPHATE: NAD+ OXIDOREDUCTASE [PHOSPHORYLATING];D-GLYCERALDEHYDE-3-PHOSPHATE: NAD OXIDOREDUCTASE (PHOSPHORYLATING);EC 1.2.1.1.2;EC: 1.2.1.12;glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from rabbit muscle;G-3-PDH;D-Glyceraldehyde 3-phosphate;NAD+ oxidoreductase (phosphorylating) |
CAS号 | 9001-50-7 |
分子式 | C3H7O6P |
分子量 | 170.057841 |
EINECS号 | 232-609-4 |
相关类别 | 氨基酸;辅酶;分子生物学;酶类;诊断用酶;酶;生化试剂;生物化学品;辅酶/酶;化学试剂;生化试剂-酶类;生化试剂-酶和辅酶;试剂盒-Elisa试剂盒 |
Mol文件 | 9001-50-7.mol |
结构式 |
3-磷酸甘油醛脱氢酶 性质
储存条件 | -20°C |
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形态 | 悬浮液 |
颜色 | 白色 |
EPA化学物质信息 | Dehydrogenase, glyceraldehyde phosphate (9001-50-7) |
CN201711376257.7提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体。得到了 来源于细菌中的3-磷酸甘油醛脱氢酶,而且该3-磷酸甘油醛脱氢酶具有低温酶的特性,制 备得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体,能够准确检测3-磷酸甘油醛脱氢酶。本发明的目的之一是提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的氨基酸序列;所述3-磷酸甘 油醛脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明的目的之二是提供一种编码3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列;所述3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的目的之三是提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体制备方法。包括以下步骤:
1)以氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的3-磷酸甘油醛脱氢酶为抗原,免疫小鼠制备抗血清;
2)纯化抗血清得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体。进一步地,所述3-磷酸甘油醛脱氢酶的制备方法为:1.1)利用PCR技术扩增SEQ ID NO.2所示的碱基序列;1.2)将SEQ ID NO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中,构建3-磷酸甘油醛脱氢 酶的表达载体;1.3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体,依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白。图3为重组菌株Ecoli BL21-pET21a-GPR表达3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白的聚丙烯 酰胺凝胶电泳鉴定图;其中M泳道为protein marker;1号泳道为3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白;
3-磷酸甘油醛脱氢酶,它可以催化3-磷酸甘油醛氧化(脱氢)和磷酸化,生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖代谢的中心环节,故对糖代谢起着重要的作用。3-磷酸甘油醛脱氢酶广布于人体各组织器官,脂肪组织含量较低,肺含酶量约为脂肪组织的10倍,肝、心含量相近,约为脂肪组织的30倍,以骨骼肌、红细胞和肾中的含量最为丰富。急性肝炎、酒精性肝病、肝硬变等可致血清GAPD总活性升高。慢性肾盂肾炎、多发性骨髓病、肺炎、肺气肿等病人血清 GAPDA活性呈不同程度的升高。3-磷酸甘油醛脱氢酶的应用前景十分广阔,它是糖代谢的中心环节,对糖代谢起着重要的作用,而对于体内缺乏此酶,糖代谢有问题的病人,通过食用含有此酶的药物,可以使病情得以缓解,治疗。该酶还分布于人体各组织器官故通过对3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性检测就可以推断是否患有此类病,对于疾病的预防有着很大作用。
本发明的目的之二是提供一种编码3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列;所述3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的目的之三是提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体制备方法。包括以下步骤:
1)以氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的3-磷酸甘油醛脱氢酶为抗原,免疫小鼠制备抗血清;
2)纯化抗血清得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体。进一步地,所述3-磷酸甘油醛脱氢酶的制备方法为:1.1)利用PCR技术扩增SEQ ID NO.2所示的碱基序列;1.2)将SEQ ID NO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中,构建3-磷酸甘油醛脱氢 酶的表达载体;1.3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体,依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白。图3为重组菌株Ecoli BL21-pET21a-GPR表达3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白的聚丙烯 酰胺凝胶电泳鉴定图;其中M泳道为protein marker;1号泳道为3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白;
3-磷酸甘油醛脱氢酶,它可以催化3-磷酸甘油醛氧化(脱氢)和磷酸化,生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖代谢的中心环节,故对糖代谢起着重要的作用。3-磷酸甘油醛脱氢酶广布于人体各组织器官,脂肪组织含量较低,肺含酶量约为脂肪组织的10倍,肝、心含量相近,约为脂肪组织的30倍,以骨骼肌、红细胞和肾中的含量最为丰富。急性肝炎、酒精性肝病、肝硬变等可致血清GAPD总活性升高。慢性肾盂肾炎、多发性骨髓病、肺炎、肺气肿等病人血清 GAPDA活性呈不同程度的升高。3-磷酸甘油醛脱氢酶的应用前景十分广阔,它是糖代谢的中心环节,对糖代谢起着重要的作用,而对于体内缺乏此酶,糖代谢有问题的病人,通过食用含有此酶的药物,可以使病情得以缓解,治疗。该酶还分布于人体各组织器官故通过对3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性检测就可以推断是否患有此类病,对于疾病的预防有着很大作用。
化学性质
白色结晶状物质,悬浮于3.2mol/L硫酸铵溶液(含0.1mmol/L EDTA)中。稳定性:5℃条件下,悬浮液可保存数月活力不变;定时更换新介质可长期保持活性不变;结冻或解冻能使其失活。每分子甘油醛-3-磷酸脱氢酶含3.8-4.0高活性的半胱氨酸残基,并能与4分子的辅酶I (NAD+)或还原辅酶I (NADH)结合,酶反应:D-甘油醛-3-磷酸+辅酶I+无机磷═1,3-二磷酸-D-甘油酸+还原辅酶I。用途
用于测定ATP甘油-3-磷酸偶联反应的生化研究,临床上常用作诊断酶,直接测定磷酸甘油酸激酶的活力。用途
常用诊断用酶。测定ATP甘油醛-3磷酸偶联反应的生化研究,并可直接用于测定磷酸甘油酸激酶的活力。生产方法
以免肌为原料,经KOH提取、硫酸铵分级分离,再经Sephadex G-50柱层析和CM-Sephadex柱层析,最后硫酸铵沉淀、重结晶而得。提供商 | 语言 |
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英文
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