慢病毒浓缩试剂盒
慢病毒浓缩试剂盒 性质
慢病毒浓缩试剂盒对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速的浓缩。该试剂盒操作简单，仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并孵育一段时间，正常转速离心，即可得到浓缩的慢病毒颗粒，回收率高达90%以上，可提高100倍病毒滴度。
1.病毒包装成功后，收集慢病毒上清液，0.45μm滤膜过滤，去除细胞和碎片。
滤膜过滤需使用低蛋白吸附的纤维素醋酸酯或聚醚砜（PES）膜。切忌用硝酸纤维素膜（NC）。
2.将慢病毒上清液与试剂盒中的浓缩液按照体积比4:1的体积混合（上清液4份，浓缩液1份），4℃孵育2h或过夜。刚开始时每隔30min混匀一下，混匀进行3次。
延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在4℃可以稳定保存数天。
3.于4℃，4000g离心25min。
4.小心去除上清，不要剧烈晃动管子，一般可见白色沉淀（有时沉淀不可见）。
5.用初始体积（原上清液体积）1/10-1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒，小心吹打均匀，重悬沉淀物。
6.重悬后的病毒以50µl/管分装，于-80℃冰箱保存。