微生物培养基

微生物非常细小,必须通过培养基才能生长出来。各种微生物都有它们不同的营养特性,也就是需要各种成分不同的培养基,因此,掌握培养基的原理、制法与应用是十分重要的,是进行微生物研究的基本技能。
【培养基成分】
1. 蛋白胨
蛋白胨是用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶 等蛋白质水解酶水解酪素、兽肉、大豆蛋白等制成的。主要成分是各种氨基酸、肽类、?等可溶性氮化合物。 因此依所用原料和酶的不同,其组成也有所不同。
由于蛋白胨的质量对微生物生长、代谢产物产生影响很大, 所以采用时应注意。但即使同一牌号的产品也会因不同批次而质量有所差异,所以尽可能使用同批产品。由于蛋白胨易潮解,使用后必须将瓶子密封。
2. 牛肉膏
牛肉膏是牛肉浸出液的浓缩物,肉中的可溶性氮 化合物、维生素等生长促进因子以及无机盐都很丰富,广泛用于细菌培养。但不同牌号的商品制法不同,所以应使用同一牌号为好。
3. 酵母膏
酵母膏系啤酒酵母或面包酵母在低温下的自溶浸出汁,经低温真空蒸发而成。富含氨基酸、维生素类、无机盐类,被广泛用于微生物的培养,近来有用来取代肉膏的趋向。
4. 麦芽汁
麦芽汁是酿造啤酒前,未加酒花,未经发酵的新鲜麦芽汁,可向啤酒厂购买,也可自制:取大麦芽粉1kg,加水3L, 保温60℃使其自行糖化,直到液体无淀粉反应为止。过滤,在滤液中加2~3个鸡蛋清(有助于麦汁的澄清); 搅均匀,煮沸,再过滤,则得麦芽汁。加水冲至10~15波林备用。麦芽汁适于培养霉菌和酵母等真菌。主要成分是麦芽糖等,但也有含氮源和生长素等。
5. 米曲汁
米曲汁被广泛用来代替麦芽汁。其制法:将米曲霉接种在大米饭上,制成大米曲。取干大米曲1kg,加水3L,保温60 ℃,使之糖化,至无淀粉反应为止。然后与制麦芽汁一样,澄清、过滤。
6. 琼脂
琼脂本由石花菜制成,近来差不多以青丝菜为原 料来制备。琼脂是一种硫酸化的聚半乳糖。琼脂含有两种主要成分:琼脂糖和琼脂胶。琼脂的特点是微生物无毒害,又不为大多数微生物利用。在加热到100℃时融化,凉至45℃时凝固,所以很适合于做培养基的固化剂。
商品琼脂规格因产地不同,常含一些不纯物质,对一些试验会产生影响。
【培养基的种类】
根据培养基的组成成分,可将培养基分为三类:
1. 合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。
2. 半合成培养基:由一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。
3. 天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成的。
从培养基的物理状态来分:
1. 液体培养基:不加凝固剂的液态状培养基。
2. 固体培养基:在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状培养基或固体状农副产品培养基。
3. 半固体培养基:在液体培养基中加入0.2%-0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。
微生物最常用的凝固剂为琼脂(其次为明胶),又叫洋菜、冻粉。它不是一种营养物质,只能被极少数种类的细菌分解利用。琼脂是从海藻中(主要是石花菜)提取而制成的。是一种多糖类化合物,主要成分是复杂的多糖硫酸酯钙盐,琼脂是一种可逆性胶体,在常规浓度下加热到96C以上即成溶胶状态,融化的琼脂,当温度下降到42℃以下,又凝固为固体。
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