背景[1][2]
Bak基因是一个新发现的bcl-2家族的同源类似物，具有211个氨基酸(约23.4 kDa)，能够促进细胞死亡，且对抗bcl-2对凋亡的保护作用。Bak与bcl_2及其家族成员有明显结构上的相似性，特别是BHI和B也结构域 。Bak与bcl-2、bcl-xL和Bax的同源性分别有25％、22％和19％。Bak在碳末端还含有疏水的跨膜结构域，说明Bak蛋白以整合的膜蛋白的形式存在。
近两年来，对Bak基因的研究逐渐深入。像Bax一样，Bak基因产物能够增加细胞对各种刺激的凋亡性反应。Bak基因确实能够显著诱导HCC-9204细胞(p53基因已突变)发生凋亡。Bak基因可能作为p53基因突变的肿瘤中诱导细胞凋亡的效应分子，直接参与凋亡的发生。最近Manchester大学癌症研究中心的一个小组针对Bak基因进行了研究，发现Bak能够接受药物引起的细胞凋亡信号并引起细胞损伤，Bak基因在正常情况下受到其它分子的控制。
为了达到活性状态，Bak必须脱离目前的“记忆状态”并发生蛋白质构象的改变。一旦构象发生改变，Bak就会接受细胞损伤性刺激并诱导细胞死亡，因此，通过体外转染Bak基因，增加细胞中Bak的表达，从而诱导细胞凋亡，这可能作为肿瘤基因治疗的一个新策略，特别是针对p53基因已发生突变的肿瘤。
Bak抗体(Bak antibody)用人工合成的人Bak蛋白Gly82附近一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。Bak抗体识别的是总Bak(total Bak)，可以检测内源性的Bak蛋白水平，未发现和其它Bal-2家族蛋白有交叉反应。BAK抗体产品为无色溶液形式，含有100 ug抗体.该产品浓度为0.5 mg/ml，溶解于包含有30% 甘油，0.5% BSA， 5 mM EDTA和0.01%硫柳汞的PBS（pH 7.2）缓冲液中。
Bak抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western-抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。
如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
主要参考资料
[1] 李江, 于欣欣. Bak 基因过表达诱导肝癌细胞凋亡[J]. 癌症: 英文版, 2000, 19(9): 891-895.