背景[1-3]
SHP-2抗体是一种针对SHP-2（Src homology 2 domain-containing protein tyrosine phosphatase 2）的特异性抗体。SHP-2是一种非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶，属于PTP（protein tyrosine phosphatase）家族成员，参与调控多种细胞过程，包括细胞生长、分化、有丝分裂周期等。
SHP-2抗体在生物学和医学研究中具有广泛的应用。它可以用于检测SHP-2蛋白在细胞和组织中的表达情况，从而揭示SHP-2在疾病发生和发展中的作用。此外，SHP-2抗体还可以用于研究SHP-2与其他蛋白质的相互作用，以及SHP-2在信号转导通路中的功能。
SHP-2的异常表达或突变与多种疾病状态有关，特别是一些肿瘤类型。例如，SHP-2的突变已被发现与慢性髓性白血病(CML)和胃肠道间质瘤(GIST)等肿瘤的发生和发展相关。因此，SHP-2抗体的检测在这些疾病的诊断和治疗中具有一定的临床意义。
SHP-2
SHP-2抗体的检测通常通过免疫组化(IHC)或免疫荧光(IF)等方法进行。在组织样本中，SHP-2抗体可以用于评估细胞中SHP-2蛋白的表达水平。此外，SHP-2抗体也可以用于检测体液样本中的SHP-2蛋白，例如血清或血浆。
在制备SHP-2抗体时，可以通过设计合成多肽的方式或蛋白表达的方式制备。客户也可以自己提供各种免疫原，如蛋白、多肽、小分子化合物等。此外，SHP-2抗体的保存条件一般为-20℃或-80℃，并且应避免反复冻融，以确保其活性和稳定性。
需要注意的是，虽然SHP-2抗体在研究中具有广泛的应用，但其特异性和敏感性可能因制备方法和实验条件的不同而有所差异。因此，在使用SHP-2抗体时，应仔细阅读其说明书，并按照正确的方法和条件进行实验操作。
应用[4][5]
SHP-2抗体可以用于长链非编码RNA对肝癌干细胞的调控作用及分子机制
检测Shp2在肝癌干细胞中的表达及生物学作用:(1)在利用多种分选技术从多种细胞系中富集的LCSCs样本中,通过real-time PCR技术检测Shp2的表达。(2)在原代LCSCs中用SHP-2抗体检测Shp2的表达,并分析Shp2与LCSCs表面标志物和干性相关转录因子的表达相关性。(3)采用干扰Shp2细胞系,通过LCSCs标志物检测、成球实验和化疗药敏感性等实验,明确Shp2对LCSCs的调控作用。(4)通过体外有限稀释和体内有限稀释实验,检测Shp2对LCSCs比例及成瘤性的影响。
Shp2的作用机制探究:(1)SHP-2抗体检测HGDNs样本及原代肝癌组织样本中Shp2的表达,分析与肝癌分化的关系。(2)利用real-time PCR,检测干扰Shp2细胞系与对照细胞系中肝细胞特异表达基因与干性相关转录因子的表达。(3)通过核浆分离、报告基因、real-time PCR实验,检测Shp2对β-catenin入核和活化的调控。(4)SHP-2抗体通过western blot、免疫共沉淀实验,明确Shp2在肝癌细胞和LCSCs中调控β-catenin信号通路的分子机制。(5)使用FH535抑制β-catenin活性,通过LCSCs表面标志物检测和成球实验,明确Shp2通过激活β-catenin调控LCSCs扩增。4.Shp2在肝癌病人个体化治疗中的应用研究:在原代肝癌组织中分析Shp2表达与病人对术后TACE治疗反应性的关系。
SHP-2抗体研究结果1.Shp2在化疗抵抗肝癌移植瘤中表达升高。2.与肝癌原发组织性比,Shp2在肝癌复发组织表达增加,与肝癌复发相关。3.Shp2在LCSCs中表达特异性升高。4.体外研究发现干扰Shp2抑制LCSCs的自我更新和扩增。5.体内有限稀释实验证实干扰Shp2可抑制肝癌细胞的体内成瘤性。6.Shp2的表达与肝癌组织分化程度相关。7.在肝癌细胞中,Shp2通过抑制CDC73磷酸化激活β-catenin,促进肝癌细胞去分化。8.在LCSCs中Shp2通过促进GSK3βSer9磷酸化,稳定β-catenin蛋白,促进LCSCs自我更新。9.FH535阻断β-catenin信号通路,可抑制Shp2对LCSCs扩增的调控。10.Shp2低表达的患者对术后TACE治疗反应性更好。
参考文献
[1]Long noncoding RNA DANCR increases stemness features of hepatocellular carcinoma by derepression of CTNNB1[J].Sheng‐xian Yuan;;Jie Wang;;Fu Yang;;Qi‐fei Tao;;Jin Zhang;;Li‐li Wang;;Yuan Yang;;Hui Liu;;Zhen‐guang Wang;;Qing‐guo Xu;;Jia Fan;;Lei Liu;;Shu‐han Sun;;Wei‐ping Zhou.Hepatology,2016(2)
[2]Long non-coding RNA DILC regulates liver cancer stem cells via IL-6/STAT3 axis[J].Xue Wang;;Wen Sun;;Weifeng Shen;;Mingyang Xia;;Cheng Chen;;Daimin Xiang;;Beifang Ning;;Xiuliang Cui;;Hengyu Li;;Xiaofeng Li;;Jin Ding;;Hongyang Wang.Journal of Hepatology,2016
[3]PTPN11/Shp2 overexpression enhances liver cancer progression and predicts poor prognosis of patients[J].Tao Han;;Dai-Min Xiang;;Wen Sun;;Na Liu;;Huan-Lin Sun;;Wen Wen;;Wei-Feng Shen;;Ruo-Yu Wang;;Cheng Chen;;Xue Wang;;Zhuo Cheng;;Heng-Yu Li;;Meng-Chao Wu;;Wen-Ming Cong;;Gen-Sheng Feng;;Jin Ding;;Hong-Yang Wang.Journal of Hepatology,2015
[4]Knockdown of long non-coding RNA XIST exerts tumor-suppressive functions in human glioblastoma stem cells by up-regulating miR-152[J].Yilong Yao;;Jun Ma;;Yixue Xue;;Ping Wang;;Zhen Li;;Jing Liu;;Liangyu Chen;;Zhuo Xi;;Hao Teng;;Zhenhua Wang;;Zhiqing Li;;Yunhui Liu.Cancer Letters,2015
[5]王雪.长链非编码RNA对肝癌干细胞的调控作用及分子机制[D].第二军医大学,2017.