背景及概述[1][2]
款冬花提取物，为倍半萜类化合物，来源于来源于菊科植物款冬花(Tussilago farfara L.)的花蕾。款冬花具有润肺下气，化痰止嗽等功效。现代药理研究表明，款冬花对呼吸系统具有止咳，祛痰和平喘作用；对交感神经、拟交感神经、血管平滑肌等具有直接兴奋作用；对在体或离体胃肠道平滑肌均呈抑制作用。款冬花分布河北、河南、湖北、四川、山西、陕西、甘肃、内蒙古、新疆、青海，西藏等地，资源丰富。
款冬花提取物有效成分为款冬花酮，无色胶状物，以及新款冬花内酯。款冬花酮和新款冬花内酯均为款冬花提取物的有效成分，有较强的抑制血小板活化因子的作用，能抑制PAF诱导的血小板聚集。
应用[3]
1.款冬花提取物喷雾剂的制备
准确称量款冬花提取物1.00g加入研钵中，加入2％的吐温-80置于上述研钵中，研 磨混合均匀，之后边加入0.9％生理盐水边研磨至混合均匀制成5mg/mL初乳，将上述初乳转 移至高速组织捣碎匀浆机中；准确称取维生素C 0.1g(抗氧化剂)加入到高速组织捣碎匀浆 机中；18000rpm/min搅拌速度下乳化3分钟后将其转移至高压均质机中，于150MPa压力下循 环均化3次，得白色均一乳状液；将制备的乳剂封装于喷雾器中，每瓶100mL，含款冬花提取 物500mg，置于凉暗处储存。
2.含有款冬花提取物的羊毛处理剂
取新鲜的款冬花、芦荟、百合、金银花各10kg，分别捣碎后加入质量分数为20%的乙醇水溶液100kg，温度设定为60℃，提取时间为3h。提取后过滤，过滤后将上清液分别真空浓缩至20kg。则获得了款冬花提取物、芦荟提取物、百合提取物及金银花提取物。再取款冬花提取物2kg、芦荟提取物6kg、百合提取物2kg、金银花提取物6kg、水180kg，合并后搅拌均匀得到羊毛处理剂。
制备 [2]
取干燥的款冬花蕾1kg粉碎，加4L石油醚(馏程60-90℃)常温浸泡5h，超声提取3 次，每次60min，提取液过滤，减压浓缩至干燥，得浸膏1.31g，即得款冬花应用于哮喘治疗的 提取物。
冬花提取物的核磁共振(1H-NMR)分析：
取实施例1中提取物20mg，加入氘代氯仿800μL溶解，取600μL上清液加入5mm核磁 管中，进行核磁共振1H-NMR分析(图1)。结合文献数据报道和标准品对照，对提取物中含有 的化合物进行结构指认，鉴定的化合物结构如图2所示。
图1
图二
款冬花提取物相指纹图谱研究：
取实施例1中款冬花提取物25mg溶于1.5mL色谱甲醇中，微孔滤膜过滤，采用如下 条件进行高效液相检测，结果如图5所示。
色谱条件：Agilent 1260高效液相色谱检测仪；艾杰尔VenusiIMP C18(5μm,4.6× 250mm)色谱柱。流动相A乙腈，流动相B 0.03％甲酸水；检测波长：220nm；流速1ml/min；柱温 25℃，进样量10微升。结合标准品对照，该提取物中含有化学成分的结构式如图6所示。
表1洗脱梯度表
通过款冬花提取物制备款冬花酮和新款冬花内酯，取10kg款冬花的花蕾粉碎后用90%乙醇超声提取2次，合并提取液加入4‰针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入80目硅胶层析柱，用二氯甲烷‑甲醇（1:5）洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥得款冬花提取物；
取正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水（7：8：5：3）置于分液漏斗中，静置分层，上相为固定相，下相为流动相，取样品溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动达到850rpm，以2.5ml/min流速泵入流动相，当流动相流出时，开始连续进样，根据检测器谱图分别收集款冬花酮流分和新款冬花内酯流分，浓缩，低温干燥即得到款冬花酮和新款冬花内酯，检测含量都在98%以上。
主要参考资料
[1] 赵强, 王飞, 王迎进, & 赵二劳. (2012). 款冬花提取物对亚硝化反应的抑制作用. 贵州农业科学, 40(9), 61-63.
[2] 李长田, 刘延鹏, 贺凤辰, & 李玉. (2012). 长白山新记录种款冬花提取物体外抗氧化活性研究(英文). Chinese Journal of Natural Medicines(4), 260-262.
[3] 贺润丽, 王晓英, 韩毅丽, 尚彩玲, & 苗得雨. (2016). 款冬花不同部位提取物镇咳祛痰作用研究. 时珍国医国药(1), 77-79.