背景[1-3]
小鼠肠静脉内皮细胞提取物是从小鼠肠静脉内皮细胞提取的，小鼠肠静脉内皮细胞从正常小鼠肠静脉组织制备。小鼠肠静脉内皮细胞提取物胞可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。肠系膜下静脉收集同名动脉所分布区域的静脉血，在胰头后面注入脾静脉，有时注入肠系膜上静脉。
内皮细胞是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成，呈多边形，细胞的边缘呈锯齿状，相互嵌合。它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。血管内皮细胞（EC）位于血浆与血管组织之间，它不仅能完成血浆和组织液的代谢交换，并且能合成和分泌多种生物活性物质，以保证血管正常的收缩和舒张，起到维持血管张力，调节血压以及凝血与抗凝平衡等特殊功能，进而保持血液的正常流动和血管的长期通畅。抗凝血材料表面内皮细胞化，可以减少血栓的形成和血小板激活。
应用[3][4]
可用于小鼠静脉内皮细胞中KLF15下游炎症相关基因的筛选及对DVT形成影响的实验研究：
深静脉血栓在临床上尤其是骨科发病率高,早期诊断较为困难,治疗难度大,并发肺栓塞后死亡率高。建立C57小鼠下腔静脉狭窄法DVT模型,造模后24小时获取小鼠下腔静脉壁组织,观察造模小鼠建模后血栓形成情况并检测静脉壁组织中KLF15,通过RNA-seq技术在全基因组范围内分析其差异性基因,探讨其与DVT形成的关系。
方法：1.60只C57小鼠分为正常组20只、DVT组20只、KLF15抑制组20只,正常组与DVT组于造模前24小时尾静脉注射生理盐水0.2ml,KLF15抑制组于造模前24小时尾静脉注射KLF15 siRNA 100nmol/只,DVT组采用下腔静脉狭窄法造模,造模24小时后获取下腔静脉组织;real-time PCR法检测静脉组织中KLF15的表达;观察血栓形成情况。2.运用RNA-seq技术,在全基因组范围内分析空白对照组与DVT组,DVT组与KLF15干扰组下游差异性基因表达结果,研究KLF15与下游基因的调控关系。
结果：在DVT组与KLF15抑制组对比中,共筛选出差异性基因218个,进一步筛选出具有显著性差异基因88个(丨log2(foldchange)丨>1)。其中表达上调的差异性基因20个,表达下调的差异性基因68个,筛选出炎性相关差异基因17个,其中Strip2、Cd51、A2m、Ankrd1等可能通过影响IL-1β、IL-6、TNF-a、TGF-β1的表达而影响深静脉血栓的形成。
结论：1.KLF15可抑制深静脉血栓的形成;2.KLF15可能调控下游基因Strip2、CD51、A2m、Ankrd1等影响深静脉血栓的形成。
参考文献
[1]The human CD5L/AIM-CD36 axis:A novel autophagy inducer in macrophages that modulates inflammatory responses[J].Lucía Sanjurjo,Núria Amézaga,Gemma Aran,Mar Naranjo-Gómez,Lilibeth Arias,Carolina Armengol,Francesc E Borràs,Maria-Rosa Sarrias.Autophagy.2015(3)
[2]STRIPAK complexes:Structure,biological function,and involvement in human diseases[J].Juyeon Hwang,David C.Pallas.International Journal of Biochemistry and Cell Biology.2013
[3]Kruppel-like factor 15 is critical for vascular inflammation[J].Lu,Yuan,Zhang,Lisheng,Liao,Xudong,Sangwung,Panjamaporn,Prosdocimo,Domenick A,Zhou,Guangjin,Votruba,Alexander R,Brian,Leigh,Han,Yuh Jung,Gao,Huiyun,Wang,Yunmei,Shimizu,Koichi,Weinert-Stein,Kaitlyn,Khrestian,Maria,Simon,Daniel I,Freedman,Neil J,Jain,Mukesh K.Journal of Clinical Investigation.2013(10)
[4]谢世伟.小鼠静脉内皮细胞中KLF15下游炎症相关基因的筛选及对DVT形成影响的实验研究[D].昆明医科大学,2018.