背景及概述[1]
络石藤为夹竹桃科植物络石藤的干燥带叶藤茎，有祛风通络、凉血消肿之功，主治风湿热痹、筋脉拘挛、腰膝酸痛等症。络石藤所含成分十分复杂，包括有木脂素类、黄酮类、三萜皂苷、紫罗兰衍生物，还有酚、醇类和生物碱等化合物。现代药理研究表明，络石藤具有植物雌激素样作用、抗癌、抗炎镇痛等作用，而木脂素类成分是其主要活性成分。在化学成分研究的过程中发现其含有大量的络石苷元，但未见有文献报道络石苷元含量测定的方法。为了测定其实际含量，有实验采用高效液相色谱法测定络石藤中络石苷元的含量，以紫外检测器检测，采用外标法峰面积计算含量，结果表明该方法操作简便、重现性好，其它成分干扰甚微，可用于络石藤中络石苷元的含量测定。
制备[1]
从络石藤中提取木脂素苷元总提取物的工艺方法，包括以下工艺步骤：
①，发酵，将络石藤粉碎成细粉，加入水或稀酸或加入络石藤细粉重量2～15％的糖苷酶和一定的水浸润络石藤细粉，于20～40℃温度下，发酵3～7天；
②，提取浸膏，在发酵物中加入8～10倍量的浓度为30～95％的乙醇或甲醇溶液浸泡24～48小时，然后进行加热回流脱除乙醇或甲醇，静置过滤去渣，将过滤液减压浓缩成浸膏；
③，用酸解法或酶解法将浸膏中所含木脂素苷转化为苷元，制取木脂素苷元粗品：A，酸解法，在浸膏中加入稀酸1～3.5当量，于100±5℃温度下搅拌水解3～8小时，冷却、离心分离，取得沉淀物；B，酶解法，在浸膏中加入无菌水或无菌生理盐水或无菌含盐磷酸缓冲液，煮沸溶解，冷却至室温，用酸和碱调节PH值至3～8，加入浸膏量1/2.5～1/10的水解酶，置恒温振荡器中于37℃温度下培养36～48小时，尔后加入6～10倍酶解液体积量的甲醇或乙醇或甲醇、乙醇的丙酮混合溶剂，以终止酶解反应，然后加热回流脱除并回收溶剂，减压过滤，取得沉淀物；
④，提纯：i)，在上述步骤③得到的沉淀物中加入稀酸调节PH值为3～6，搅拌反应2小时，然后过滤或离心分离，弃去分离液，留下沉淀物；ii)，在留下含量测定析检测，总提取物中的络石苷元、去甲基络石苷元、牛蒡子苷元和罗汉松脂素总含量为11.50g，纯度为81.3％。
含量测定[2]
有研究建立测定中药络石藤中络石苷元含量的高效液相色谱方法。方法甲醇-水(7∶3)提取药材，经酸水解、碱水解后调pH值为6.0沉淀用甲醇溶解，高效液相色谱法测定，SymmetryC18(3.9mm×150mm，5μm)，流动相甲醇-水(45∶55)，流速0.8ml.min-1，检测波长280nm，采用外标法峰面积计算含量。结果络石苷元溶液在5.07～81.12mg.L-1时与其吸收值呈良好线性关系(r=0.9997)，平均加样回收率为99.76%，RSD=0.83%。结论该方法操作简便、快捷，结果准确、可靠，适用于络石藤中络石苷元的含量测定。
主要参考资料
[1] CN200610049735.9络石藤的木脂素苷元总提取物及其提取工艺
[2] HPLC法测定络石藤中络石苷元的含量