背景及概述[1]
DLIN-M-C3-DMA化学名称为4-(N，N-二甲基胺基)丁酸-6，9，28，31-四烯-19-三十七醇酯，可用于制备脂质体制剂。脂质体制剂中包括互补双阳性脂质、磷脂和长效脂质。互补双阳性脂质包括：阳性脂质和第二阳性脂质。DLIN-M-C3-DMA可用作阳性脂质。
制备[1]
步骤1：亚油醇2的合成，反应方程式如下：
1L烧瓶中通入干燥氩气，然后将亚油酸1(30g，107mmol)及THF(320mL)加入反应器中。使用丙酮-干冰浴冷却至0℃。将红铝的甲苯溶液(73mL，60％wt/vol)缓慢滴加至反应器中，滴加过程中保持温度在0℃以下。滴加完毕后，室温反应2小时。反应完毕后，溶液冷却至0℃，缓慢加入饱和的硫酸钠溶液(5.75gNa2SO4溶于7.85mL水中)，滴加时间不低于45min。滴加完毕后，30min内滴入乙酸乙酯(130mL)，并剧烈搅拌。反应液过滤，固体用乙酸乙酯(90mL)冲洗，合并有机相，浓缩。产物溶解于乙酸乙酯(90mL)中，并用水(45mL)洗两次，并用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩有机相并用真空泵除去有机溶剂，得到产品2(28.8g)。
步骤2：甲烷磺酸亚油酯3的合成，反应方程式如下：
500mL烧瓶中通入干燥氩气，然后加入上述产物2(25g，94mmol)及二氯甲烷(DCM，210mL)，然后加入三乙胺(TEA，53mL)及DMAP(1.15g，2.0mol)，溶液使用丙酮-干冰浴冷却至冷却至-10℃。甲烷磺酸酐(32.7g，188mmol)溶于DCM(45mL)中，缓慢滴加至反应器中。滴加时间不低于1小时，并始终保持反应液温度在0℃以下。反应液滴加完毕，继续保持0℃反应1小时。反应完毕后，冰水(80mL)加入反应液中，水相用DCM(45mL)萃取。合并有机相，有机相用稀盐酸(9mLHCl溶于36mL水中)(2×45mL)，水(2×35mL)及盐水(50gNaCl溶于45mL水中)(45mL)洗涤，硫酸钠(12.5g)干燥。过滤，浓缩有机相并用真空泵除去有机溶剂，得到产品3(32.3g)。
步骤3：1-溴代亚油烷4的合成，反应方程式如下：
500mL烧瓶中通入干燥氩气，然后加入DMF(110mL)及产品3(30g，87mmol)，溶液使用丙酮-干冰浴冷却至冷却至-10℃。LiBr(11.5g，132mmol)溶于DMF(110mL)，搅拌并缓慢滴加至反应器中。保持反应液温度在0℃以下。滴加完毕后，反应液升温至45℃，搅拌反应18-20小时。反应完毕后，加入水(300mL)，并用正己烷(240mL)萃取。合并有机相，并用盐水(59gNaCl溶于45mL水中)(2×45mL)洗涤，硫酸钠(17g)干燥。过滤，浓缩有机相并用真空泵除去有机溶剂，得到粗品(27.5g)。用60-120目硅胶纯化(正己烷为流动相)，得到纯品4(23g，三步产率为81％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)，δ＝5.41-5.29(m，4H)，4.20(d，2H)，3.40(t，2H)，2.77(t，2H)，2.09-2.02(m，4H)，1.88-1.00(m，2H)，1.46-1.27(m，18H)，0.88(t，3H)。
步骤4：6，9，28，31-四烯-19-三十七醇6a的合成，反应方程式如下：
250mL三口烧瓶中通入干燥氩气，然后加入活化的Mg(2.21g，92mmol)及无水乙醚(12mL)。产物4(20g，61mmol)溶解于无水乙醚(40mL)中。氩气保护下，该溶液(8mL)加至反应器中，并加入二溴甲烷(0.2mL，2.8mmol)。反应器在水浴中升温至40℃。反应开始后，移去热源，将剩余溶液(32mL)滴加至反应器中(1小时内)，让混合物保持轻微回流状态。滴加完毕后，开始加热使其保持回流状态反应1小时。原料反应完毕后，反应液用冰浴冷却至10℃以下，然后缓慢加入甲酸乙酯的乙醚溶液(2.2mL溶于32mL乙醚中)。室温反应1小时。然后加入冰水(56mL)及10％的硫酸溶液(27.2mL硫酸溶于272mL冰水里)，分离有机相，水相用乙醚(3x80mL)抽提。合并有机相，并用(盐水80mL)洗涤，硫酸钠(16g)干燥。过滤，浓缩有机相并用真空泵除去有机溶剂，得到粗品(醇及甲酸酯混合物)。粗品用100mLTHF溶解，加入NaOH溶液(7.5g溶于150mL水中)，加热至65℃反应18小时。反应完全后，反应物冷却至室温，并用乙醚(3*100mL)抽提，合并有机相，并用盐水(40mL)洗涤。硫酸钠(40g)干燥。过滤，浓缩有机相。粗品用60-120目硅胶纯化(4％乙醚/正己烷)，得到纯品6a(11.6g，产率为80％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)，δ＝5.47-5.24(m，8H)，3.70-3.50(m，1H)，2.85-2.66(m，4H)，2.12-1.91(m，9H)，1.55-1.17(m，46H)，0.90-0.80(m，6H)。
步骤5：4-(N，N-二甲基胺基)丁酸-6，9，28，31-四烯-19-三十七醇酯(DLIN-M-C3-DMA，CL01)的合成，反应方程式如下：
100mL烧瓶中加入反应产物6a(5g，9.5mmol)溶解在DCM(40mL)中，加入原料9(4-(二甲基氨基)丁酸盐酸盐)(1.9g11.4mmol)，然后加入二异丙基乙基胺(2.5mL)及DMAP(0.14g1.4mmol)。室温搅拌5min后，溶液中加入EDC·HCl(2.78g，14.5mmol)，室温搅拌过夜。反应完全后，溶液用20mLDCM稀释。然后用16mL饱和NaHCO3、16mL水及16mL饱和食盐水洗，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约6.25g。使用Flash柱纯化(90g硅胶，用210mL含0.1％TEA的DCM上柱；流动相分别为：140mL0.1％TEA的DCM；560mL2％甲醇+98％含0.1％TEA的DCM；140mL2.5％甲醇+97.5％含0.1％TEA的DCM；420mL3％甲醇+97％含0.1％TEA的DCM)分离得到纯的产品10(CL01，5.5g，91％)无色油状产物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)，δ＝5.47-5.24(m，8H)，4.93-4.77(m，1H)，2.85-2.66(m，4H)，2.37-2.22(m，4H)，2.12-1.91(m，9H)，1.85-1.69(m，2H)，1.49(d，J＝5.4，4H)，1.39-1.17(m，39H)，0.90-0.80(m，6H)。
参考文献
[1][中国发明]CN201210393528.0脂质体制剂、制备方法及其应用