C4-2B 人前列腺癌细胞的应用

2020/6/9 11:22:15

C4-2B 人前列腺癌细胞的简介[1]

C4-2B,人前列腺癌细胞上皮样细胞呈多角形,尺寸更为规则,贴附在基质上呈散在斑片状生长。

产品名称: C4-2B

中文名称:人前列腺癌细胞

细胞数量:1*10^6

组织来源:前列腺癌;左锁骨上淋巴结转移;男性

细胞种属:人

生长特性:贴壁

细胞污染: HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

培养基:1640,90%;FBS,10%;双抗。

传代方法:1:2-1:4

培养条件:空气, 95%; CO2, 5%。温度: 37℃

C4-2B 人前列腺癌细胞操作步骤[1]

细胞传代

如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

复苏细胞

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存

待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;  1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞运输

干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶)

主要参考文献

[1]李刚 王磊 刘会 吕涛 徐淑娜 董传海;雷帕霉素对人前列腺癌C4-2B细胞增殖和凋亡的影响。Journal of Clinical and Experimental Medicine

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