Anti-Cyclooxygenase 1抗体的应用

2020/8/20 16:05:16

背景[1-3]

Anti-Cyclooxygenase 1抗体是一类可以特异性结合Anti-Cyclooxygenase 1的多克隆抗体,主要用于检测Anti-Cyclooxygenase 1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理:双抗体夹心法测定标本中Anti-Cyclooxygenase 1水平。用纯化的Anti-Cyclooxygenase 1抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Anti-Cyclooxygenase 1,再与HRP标记的Anti-Cyclooxygenase 1抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Anti-Cyclooxygenase 1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中Anti-Cyclooxygenase 1浓度。

环氧化酶(Cyclooxygenase,COX)又称前列腺素内氧化酶还原酶,是一种双功能酶,具有环氧化酶和过氧化氢酶活性,是催化花生四烯酸转化为前列腺素的关键酶。目前发现环氧化酶有两种COX-1和COX-2同工酶。

前者为结构型,主要存在于血管、胃、肾等组织中,参与血管舒缩、血小板聚集、胃粘膜血流、胃黏液分泌及肾功能等的调节,其功能与保护胃肠黏膜、调节血小板聚集、调节外周血管的阻力和调节肾血流量分布有关。

后者为诱导型,各种损伤性化学、物理和生物因子激活磷脂酶A2水解细胞膜磷脂,生成花生四烯酸,后者经COX-2催化加氧生成前列腺素。

应用[4][5]

用于COX-1基因—吸烟交互作用与缺血性卒中预后的相关性研究

阿司匹林是临床上缺血性卒中二级预防使用最为广泛的药物。尽管常规服用治疗剂量的阿司匹林作为缺血性卒中的二级预防,临床上仍有一部分患者对阿司匹林反应不足,并出现不良结局,这种现象称为“阿司匹林抵抗”。遗传因素和环境因素可能独自或者共同在其中扮演着重要的角色。

环氧化酶-1(Cyclooxygenase-1,COX-1)作为阿司匹林的直接作用靶点,其编码基因COX-1的遗传变异可能导致对阿司匹林不敏感。而吸烟作为一种重要的环境危险因素,与人体多种疾病存在相关性。然而,二者是否存在交互作用,以及交互作用的程度如何,是否会对服用阿司匹林的卒中患者预后产生不良影响目前仍不清楚。

建立中国汉族服用阿司匹林的缺血性卒中队列,分析COX-1基因多态性、吸烟以及二者的交互作用对缺血性卒中患者功能预后的影响。

方法:基于南京卒中注册系统,提取2009年12月份到2012年10月份服用阿司匹林的急性缺血性卒中患者。

采用改良多重连接酶检测反应(Improved Multiple Ligase Detection Reaction,iMLDR)方法对三个COX-1基因的单核苷酸多态性位点(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)rs1330344,rs3842788和rs5788进行基因分型。

参考文献

[1]Interaction among COX-2,P2Y1 and GPIIIa gene variants is associated with aspirin resistance and early neurological deterioration in Chinese stroke patients[J].Xingyang Yi,Chun Wang,Qiang Zhou,Jing Lin.BMC Neurology.2017(1)

[2]Enteric Coating and Aspirin Nonresponsiveness in Patients With Type 2 Diabetes Mellitus[J].Deepak L.Bhatt,Tilo Grosser,Jing-fei Dong,Douglas Logan,Walter Jeske,Dominick J.Angiolillo,Andrew L.Frelinger,Lanyu Lei,Juan Liang,Jason E.Moore,Byron Cryer,Upendra Marathi.Journal of the American College of Cardiology.2017(6)

[3]Stroke Risk Factors,Genetics,and Prevention[J].Amelia K.Boehme,Charles Esenwa,Mitchell S.V.Elkind.Circulation Research.2017(3)

[4]Global Burden of Stroke[J].Valery L.Feigin,Bo Norrving,George A.Mensah.Circulation Research.2017(3)

[5]蔡洹.COX-1基因—吸烟交互作用与缺血性卒中预后的相关性研究[D].南方医科大学,2017.

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