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ANTI-TNF RECEPTOR II抗体的应用

发布日期:2020/8/24 13:23:28

背景[1-3]

ANTI-TNF RECEPTOR II抗体是一类可以特异性结合TNF RECEPTOR II的多克隆抗体,主要用于检测TNF RECEPTOR II的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理:双抗体夹心法测定标本中TNF RECEPTOR II水平。用纯化的TNF RECEPTOR II抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入TNF RECEPTOR II,再与HRP标记的TNF RECEPTOR II抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TNF RECEPTOR II呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中TNF RECEPTOR II浓度。

TNF受体在多种细胞中调控多种功能如:生长、分化和凋亡。

TNF受体主要有两种形式的分子。它们都是I类膜蛋白。由于两个不同的配体TNFα、LT-α(lymphotoxine-α)可与两个受体结合,TNF/TNFR系统的生物功能比CD95L/CD95系统(CD95,就是APO-1/Fas,APO-1/Ras为I型跨膜糖蛋白,分子量45KD,属于NGF/TNF受体家族,广泛分布于多种组织中)要复杂的多,同时对前者的了解也少的多。

TNF-α介导的信号传导,主要通过两个结构不同的受体进行:1型受体(TNFR1,又称作p60,p55,CD120a)和2型受体(TNFR2,又称作p80,p75,CD120b)。两种受体都是跨膜的糖蛋白,膜外N端区域具有多个半胱氨酸丰富的重复序列。虽然这两种受体的膜外部分有结构和功能上的同源性,但细胞膜内部分却完全不同,他们所介导的信号传导通路有所重叠,但也区别明显。

应用[4][5]

用于肿瘤坏死因子受体2在人非小细胞肺癌中的表达及作为预后生物标志物的潜在作用研究

肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)和肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)都是肿瘤坏死因子(TNF)的受体。由于它们不同的细胞质结构域,这两种受体在与TNF相互作用时引发不同的信号传导途径。

TNFR1信号传导途径已被广泛研究。它通过激活其细胞质区域中的死亡结构域来介导TNF的细胞毒性作用并诱导细胞凋亡信号传导途径,这可能导致有效的抗肿瘤作用。

然而,与TNFR1相比,很少有研究去阐明TNFR2信号传导途径。TNFR2主要在T淋巴细胞,髓样抑制细胞,内皮细胞,心肌细胞,少突胶质细胞和胸腺细胞中表达,在抗炎过程和免疫调节中起重要作用。最近TNFR2在肿瘤进展中的作用的相关研究有所增加。

TNFR2已被发现于各种肿瘤,如卵巢癌、乳腺癌、食道癌、骨髓瘤和结肠直肠癌,TNFR2被认为是肿瘤促进因子,通过促进肿瘤细胞增殖,激活免疫抑制细胞参与肿瘤进展,并支持免疫逃逸。

然而,关于TNFR2在人NSCLC组织中的表达的研究极少,因此,研究TNFR2在NSCLC中的表达,可能成为治疗NSCLC的新靶点。

研究方法1.免疫组织化学法(IHC)检测收集的71名NSCLC患者的组织和对应的25名癌旁非肿瘤组织的TNFR2蛋白的表达分布。

2.Western blot法检测非小细胞肺癌细胞系A549、H1299、H1975和正常肺上皮细胞Beas-2B的TNFR2蛋白的表达,qRT-PCR检测非小细胞肺癌细胞系A549、H1299、H1975和正常肺上皮细胞Beas-2B的TNFR2 mRNA的表达。

参考文献

[1]Cancer statistics,2019[J].Rebecca L.Siegel MPH,Kimberly D.Miller MPH,Ahmedin Jemal DVM,PhD.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2019(1)

[2]Molecular mechanism of Gd@C 82(OH)22 increasing collagen expression:Implication for encaging tumor[J].Jing Liu,Seung-gu Kang,Peng Wang,Yue Wang,Xiaonan Lv,Ying Liu,Fei Wang,Zonglin Gu,Zaixing Yang,Jeffrey K.Weber,Ning Tao,Zhihai Qin,Qing Miao,Chunying Chen,Ruhong Zhou,Yuliang Zhao.Biomaterials.2018

[3]Blockade of TNFR2 signaling enhances the immunotherapeutic effect of CpG ODN in a mouse model of colon cancer[J].Yingjie Nie,Jiang He,Hidekazu Shirota,Anna L.Trivett,De Yang,Dennis M.Klinman,Joost J.Oppenheim,Xin Chen.Science Signaling.2018(511)

[4]TNFR2:A Novel Target for Cancer Immunotherapy[J].éva S.Vanamee,Denise L.Faustman.Trends in Molecular Medicine.2017(11)

[5]陈倩倩.肿瘤坏死因子受体2在人非小细胞肺癌中的表达及作为预后生物标志物的潜在作用[D].天津医科大学,2019.

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