背景[1-3]
兔多克隆抗体TO BAX是一类可以特异性结合BAX的多克隆抗体，主要用于检测BAX的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。
检测原理：双抗体夹心法测定标本中BAX水平。用纯化的BAX抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入BAX，再与HRP标记的BAX抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的BAX呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中BAX浓度。
bax基因是人体最主要的凋亡基因，属于bcl-2基因家族，编码的Bax蛋白可与Bcl-2形成异二聚体，对Bcl-2产生阻抑作用。研究发现Bax/Bcl-2两蛋白之间的比例关系是决定对细胞凋亡(Apoptosis)抑制作用强弱的关键因素，因此认为，bax是极重要的促细胞凋亡(Apoptosis)基因之一。Bax的表达更为广泛，它可出现在肝细胞、肾小管上皮细胞、呼吸系上皮细胞和支气管平滑肌、血管平滑肌细胞中。
BAX属于兔抗人多克隆抗体。试验中适用组织为石蜡切片，其阳性部位为细胞浆，阳性对照为乳腺癌，组织处理为热修复。BAX是与BCL-2同源的水溶性相关蛋白，是BCL-2基因家族中细胞凋亡促进基因，BAX的过度表达可拮抗BCL-2的保护效应而使细胞趋于死亡。目前多和BCL-2一起用于肿瘤的研究。
应用[4][5]
用于中药活骨注射液在兔股骨头缺血性坏死修复过程中VEGF、bFGF、IGF-1、0PG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3的表达情况的实验研究
通过动物实验的方法,从细胞分子水平,研究中药活骨注射液对VEGF、bFGF、IGF-1、OPG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3表达的影响,探讨活骨注射液治疗股骨头缺血性坏死的作用机制,为活骨注射液治疗股骨头缺血性坏死提供理论依据。
研究方法：随机分为两组,即空白组(30只)、模型组(90只)。模型组行兔股骨头坏死动物造模后再随机分为3组：盐水组、对照组、实验组各30只动物。空白组正常饲养,不给予任何药物治疗。盐水组给予0.9%生理盐水0.70ml/次,每三日一次髋关节腔灌注。
对照组给予冠心宁注射液每三日一次髋关节灌注0.70ml/次。实验组给予活骨注射液每三日一次髋关节灌注,剂量0.70ml/次。造模术后两周开始治疗,各组按1、3、6、9、12周时间点分批处死动物,每批每组6只,进行检测。
采用免疫组化、Real-time PCR及Western blot三种方法检测兔股骨头缺血性坏死修复过程中VEGF、bFGF、IGF-1蛋白的表达情况。
参考文献
[1]Increased VEGF Expression in the Epiphyseal Cartilage After Ischemic Necrosis of the Capital Femoral Epiphysis[J].Harry KWKim,HaikuoBian,TimothyRandall,AmandaGarces,Louis CGerstenfeld,Thomas AEinhorn.J Bone Miner Res.2009(12)
[2]ApoB C7623T polymorphism predicts risk for steroid-induced osteonecrosis of the femoral head after renal transplantation[J].Tetsurou Hirata,Mikihiro Fujioka,Kenji A.Takahashi,Yuji Arai,Takeshi Asano,Masashi Ishida,Masaaki Kuribayashi,Kiyokazu Akioka,Masahiko Okamoto,Norio Yoshimura,Yoshiko Satomi,Hoyoku Nishino,Wakaba Fukushima,Yoshio Hirota,Shigeo Nakajima,Shigeaki Kato,Toshikazu Kubo.Journal of Orthopaedic Science.2007(3)
[3]Comparative analysis of serum proteomes:discovery of proteins associated with osteonecrosis of the femoral head[J].Xiaoyun Tan,Daozhang Cai,Yaoliang Wu,Bin Liu,Limin Rong,Zhusheng Chen,Qichun Zhao.Translational Research.2006(3)
[4]Differential Regulation of Telomerase in Endothelial Cells by Fibroblast Growth Factor‐2 and Vascular Endothelial Growth Factor‐A:Association with Replicative Life Span[J].ELISABETHTRIVIER,DAVID J.KURZ,YINGHONG,HSIU‐LINHUANG,JORGE D.ERUSALIMSKY.Annals of the New York Academy of Sciences.2006(1)
[5]张文进.中药活骨注射液在兔股骨头缺血性坏死修复过程中VEGF、bFGF、IGF-1、0PG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3的表达情况的实验研究[D].黑龙江中医药大学,2016.