ANTI-HUMAN IL-6的应用

2020/8/25 13:54:14

背景[1-3]

ANTI-HUMAN IL-6是一类可以特异性结合HUMAN IL-6的多克隆抗体,主要用于检测HUMAN IL-6的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理:双抗体夹心法测定标本中HUMAN IL-6水平。用纯化的HUMAN IL-6抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入HUMAN IL-6,再与HRP标记的HUMAN IL-6抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的HUMAN IL-6呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中HUMAN IL-6浓度。

白细胞介素-6(Interleukin-6),简称白介素6(IL-6),是一种功能广泛的多效性细胞因子。IL-6可调节多种细胞的生长与分化,具有调节免疫应答、急性期反应及造血功能,并在机体的抗感染免疫反应中起重要作用。

IL-6在多种疾病时有明显改变,其表达失调可引起许多疾病,其临床表现主要为发病时IL-6水平增高。在发生内外伤、外科手术,应激反应,感染,脑死亡,肿瘤产生以及其它情况的急性炎症反应过程中IL-6会快速生成。手术病人的IL-6浓度能够预示是否会有手术并发症的产生。

连续检测重症监护病人血清或血浆中IL-6的水平能有效的评估系统性炎症反应综合症(SIRS)的严重程度,脓毒血症以及脓毒血症性休克的预后情况。IL-6的血清浓度水平增高早于PCT和CRP,能作为脓毒血症的早期警告指标。IL-6还在慢性炎症反应(如类风湿关节炎)中扮演着重要角色。

应用[4][5]

用于人退变腰椎间盘组织中p53与IL-1β、IL-6表达的实验研究

通过检测p53和白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)在退变与正常的腰椎间盘髓核组织中的表达,比较两组的表达水平,分析p53与IL-1β、IL-6表达的相关性,以及椎间盘退变等级与p53、IL-1β、IL-6表达的相关性。探讨p53、IL-1β、IL-6在椎间盘退变中的作用及意义。

方法:收集40例腰椎间盘突出症患者的椎间盘髓核组织,其中男22例,女18例,突出部位L4/5,术后病理证实为退变椎间盘髓核组织,并纳入退变组。另取20例腰椎爆裂型骨折手术患者受累椎间盘髓核组织,其中男14例,女6例,受累部位L4/5,术后病理证实为正常椎间盘髓核组织,并纳入正常组。将髓核根据Thompson分级分为五级。

应用免疫组织化学方法检测髓核标本中p53与IL-1β、IL-6的表达。分别记录三者的细胞染色阳性率并进行分级,采用X2检验方法(chi-square test)对三者在退变组与正常组的细胞染色阳性率进行比较,同时采用spearman等级相关分析方法分析椎间盘退变等级与p53、IL-1β、IL-6表达的相关性。

应用Western-Blot技术检测髓核标本中p53与IL-1β、IL-6的表达,两组之间采用独立样本t检验进行比较,同时采用spearman等级相关分析方法分析p53分别与IL-1β、IL-6表达的相关性。

参考文献

[1]Association of p53/p21 expression and cigarette smoking with tumor progressionand poor prognosis in non-small cell lung cancer patients[J].Deyao Xie,Linhua Lan,Kate Huang,Lin Chen,Cuicui Xu,Rongrong Wang,Yang Shi,Xiaoyi Wu,Lu Wang,Yongzhang Liu,Bin Lu.Oncology Reports.2014(6)

[2]Inflammatory response of intervertebral disc cells is reduced by fibrin sealant scaffold in vitro[J].Zorica Buser,Jane Liu,Kevin J.Thorne,Dezba Coughlin,Jeffery C.Lotz.J Tissue Eng Regen Med.2014(1)

[3]Inflammatory Cytokines Associated with Degenerative Disc Disease Control Aggrecanase-1(ADAMTS-4)Expression in Nucleus Pulposus Cells through MAPK and NF-κB[J].Ye Tian,Wen Yuan,Nobuyuki Fujita,Jianru Wang,Hua Wang,Irving M.Shapiro,Makarand V.Risbud.The American Journal of Pathology.2013(6)

[4]Increased IL-17 expression in degenerated human discs and increased production in cultured annulus cells exposed to IL-1ßand TNF-α[J].HE Gruber,GL Hoelscher,JA Ingram,HJ Norton,EN Hanley.Biotechnic&Histochemistry.2013(6)

[5]王炎.人退变腰椎间盘组织中p53与IL-1β、IL-6表达的实验研究[D].东南大学,2015.

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