仓鼠抗小鼠CD28的应用

2020/9/9 9:37:20

背景[1-3]

仓鼠抗小鼠CD28采用杂交瘤单克隆抗体技术制备,抗体类别为IgG。本品经纯化溶于PBS(pH7.4,含NaN3),可用于小鼠CD28细胞的检测分析与功能研究。本品可用于流式细胞分析,免疫组化,IP和功能分析等实验。

CD28是T淋巴细胞表面表达的共刺激分子,对T细胞的活化起到重要作用。它与APC(抗原递呈细胞)上的B7分子结合,介导T细胞的共刺激并促进其存活、增殖以及产生细胞因子。

对于Tc和Th细胞来说,共刺激信号传导降低了T细胞活化的阈值,促进了T细胞的增殖和分化。在没有CD28共刺激存在时,初始T细胞不会被活化,也不会发生应答。

CD28参与的共刺激有多方面重要的分子效应:1.诱导T细胞表面IL-2R(白介素-2受体)的表达,从而允许细胞接收第三信号;2.使Th细胞开始分泌大量的细胞因子和趋化因子;3.诱导表达和上调表达在Th和Tc细胞内其他共刺激和调节分子.

小鼠CD28也称Tp44,T44,是一种分子量约44kD的Ⅰ型跨膜糖蛋白,属Ig超家族成员,主要在小鼠胸腺细胞,外周血T淋巴细胞,NK细胞上表达。CD28与CD80(B7-1)和CD86(B7-2)结合作为第二信号参与T细胞与NK细胞的活化与增殖。有研究报道,CD28与其抗体结合可促进T细胞的增殖和细胞因子的分泌,促进CTL细胞的发育。

应用[4][5]

用于HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞功能与PD1、CD28表达分析研究

研究HBV转基因小鼠肝脏中NKT细胞的功能与表面PD1、CD28表达的关系。方法分离小鼠肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结单个核细胞,利用流式细胞检测技术,分别检测其淋巴细胞中NKT细胞的频率,同时检测肝脏NKT细胞PD1、CD28的表达及IFN-γ、IL-4的分泌功能,比较肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结这几个主要免疫组织淋巴细胞中NKT细胞所占的比例,并分析肝脏NKT细胞PD1、CD28的表达与细胞功能的关系。

结果与正常同品系小鼠比较,HBV转基因小鼠肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结NKT细胞数量明显减少(P<0.05),与脾脏、胸腺和腹膜淋巴结相比,肝脏淋巴细胞中含有大量的NKT细胞;与正常同品系小鼠比较,HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞PD1的表达明显增多(P<0.05),CD28的表达明显减少(P<0.05),肝脏NKT细胞IFN-γ、IL-4的分泌功能明显降低(P<0.05)。

结论肝脏中含有大量的NKT细胞,HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞的功能存在明显的缺陷,并提示PD1的增加和CD28的降低可能与NKT细胞功能的下调密切相关。

参考文献

[1]PD-1 expression onHIV specific T cells is associated with T cell exhaustion anddisease progression.Barber DL,Wherry EJ,Masopust D,et al.Nature.2006

[2]Frequency and phenotype ofcirculatingValpha24/Vbeta11 double-positive natural killer Tcells duringhepatitis Cvirus infection.Lucas M,Gadola S,Meier U,et al.Journal of Virology.2003

[3]Severe functionalimpairment and elevated PD-1 expression in CD1d-restrictedNKTcells retained duringchronic HIV-1 infection.Moll M,Kuylenstierna C,GonzalezVD,et al.European Journal of Immunology.2009

[4]β-Glycoglycosphingolipid-induced augmentation of theanti-HBV immune response is associated with altered CD8and NKT lymphocyte distribution:A novel adjuvant for HBVvaccination.Mizrahi M,Lalazar G,Ben Ya’’’’acov A,et al.Vaccine.2008

[5]汪晓凤,邓红丽,张建明,雷宇,陈敏,石统东.HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞功能与PD1、CD28表达分析[J].免疫学杂志,2012,28(04):277-281.

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