背景[1-3]
二甲基苯胺单加氧酶3抗体是一类可以特异性结合二甲基苯胺单加氧酶3的一类多克隆抗体，主要用于体外检测二甲基苯胺单加氧酶3的免疫学实验。
二甲基苯胺单加氧酶是一类重要的药物代谢酶，可催化各种含氮，硫和磷的异生物（如治疗药物，膳食化合物，农药）的NADPH依赖性氧合。人类FMO基因家族由5个基因和多个假基因组成。FMO成员具有独特的发育和组织特异性表达模式。这种FMO3基因的表达是成年肝脏中表达的主要FMO，在个体之间的差异可能高达20倍。FMO3表达水平的这种个体间差异可能会对异生质代谢的速率产生重大影响。这种跨膜蛋白位于许多组织的内质网中，该基因的可变剪接导致编码不同同工型的多个转录变体。该基因中的突变会引起三甲胺症（TMAu），其特征在于未代谢的三甲胺的积累和排泄以及独特的体味。在健康个体中，三甲胺主要转化为无味的三甲胺N-氧化物。
二甲基苯胺单加氧酶3抗体结构图
二甲基苯胺是一种无色至淡黄色油状液体，有刺激性臭味，在空气中或阳光下易氧化使色泽变深。
二甲基苯胺主要引起高铁血红蛋白血症和肝、肾及皮肤损害。
短期内皮肤吸收或吸入大量苯胺者先出现高铁血红蛋白血症，表现为紫绀，舌、唇、指（趾）甲、面颊、耳廓呈蓝褐色，严重时皮肤、黏膜呈铅灰色，并有头晕、头痛、乏力、胸闷、心悸、气急、食欲不振、恶心、呕吐，甚至意识障碍。高铁血红蛋白10%以上，红细胞中出现赫恩兹小体。可在中毒4天左右发生溶血性贫血。中毒后2-7天内发生毒性肝病。口服中毒出上述症状外，胃肠道刺激症状较明显。
应用[4][5]
用于FMO3过表达模拟热量限制抗肝脏衰老的作用及作用机制研究
观察过表达FMO3和抑制自噬等方法对机体造成的改变,探究肝脏FMO3在抗肝脏衰老中的作用及作用机制。
内容:通过观察40%热量限制对小鼠的影响,探究热量限制对肝脏衰老相关指标、自噬相关指标、及肝脏FMO3表达的影响。
通过注射腺病毒激活肝脏的FMO3表达,探究FMO3过表达对肝脏衰老相关指标的影响及其与热量限制的协同作用,并进一步探究FMO3过表达对自噬及自噬相关通路的影响。对FMO3过表达组的小鼠注射自噬抑制剂,观察抑制自噬是否能阻断FMO3激活对小鼠肝脏的抗衰老作用,探究自噬是否是FMO3抗肝脏衰老的作用机制。
方法:通过尾静脉注射腺病毒Adeno-FMO3过表达肝脏FMO3表达;通过腹腔注射bafilomycin A1抑制自噬;运用相应的试剂盒检测血浆和肝脏的脂代谢相关指标TC、TG,以及肝脏组织氧化应激相关指标MDA、SOD等;
运用ELISA的方法检测血浆中糖代谢相关指标胰岛素、炎症相关指标IL-6;运用蛋白质印迹法检测肝脏衰老相关指标β-gal、p16,自噬相关指标LC3、p62,及mTOR通路相关蛋白;通过油红染色检测肝脏脂质沉积变化;通过电镜观察反映自噬水平的自噬小体。结果:FMO3过表达能模拟热量限制的作用,缓解肝脏衰老,改善小鼠肝脏氧化应激、炎症反应和脂质代谢情况,且能够抑制mTOR通路,激活自噬,而抑制自噬能够减弱FMO3过表达对老年小鼠肝脏的抗肝脏衰老作用。
结论:FMO3过表达能模拟热量限制对老年小鼠肝脏的抗衰老作用,且FMO3过表达通过激活mTOR介导的自噬,从而延缓肝脏衰老进程。
参考文献
[1]Oxidative stress and first-Line antituberculosis drug-induced hepatotoxicity.Yew WW,Chang KC,Chan DP.Antimicrobial Agents and Chemotherapy.2018
[2]Genes and gene expression modules associated with caloric restriction and aging in the laboratory mouse.Swindell William R.BMC Genetics.2009
[3]Genetic and Nongenetic Factors Associated with Protein Abundance of Flavin-Containing Monooxygenase3 in Human Liver.Xu M,Bhatt D K,Yeung C K,Claw K G,Chaudhry A S,Gaedigk A,Pearce R E,Broeckel U,Gaedigk R,Nickerson D A,Schuetz E,Rettie AE,Leeder J S,Thummel K E,Prasad B.Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics.2017
[4]Effects of aging on fat deposition and meat quality in Sheldrake duck.He J,Zheng H,Pan D,Liu T,Sun Y,Cao J,Wu Z,Zeng X.Poultry Science.2018
[5]郭东豪.FMO3过表达模拟热量限制抗肝脏衰老的作用及作用机制[D].上海交通大学,2019.