背景及概述[1]
脱氧助间型霉素又叫喷司他丁，化学名为(8R)-3-(2-脱氧-β-D-赤-戊呋喃糖基)-3，4，7，8-四氢咪唑并[4，5-d][1，3]二氮杂草-8-醇，是拟嘌呤类的抗肿瘤药，主要用于毛细胞白血病(hairy cell leukemia，缩写HCL)等的治疗。
提取纯化方法[1]
用氢氧化钠溶液将喷司他丁发酵液的pH调至7.9，加入3％(w/v)珍珠岩助滤剂，经板框过滤，得到喷司他丁滤液。将700ml D261树脂(上海华震科技贸易公司生产)装入Φ50X400mm的层析柱中，对树脂进行酸洗(2升2mol/L盐酸浸泡6小时)、水洗(纯化水洗涤至中性)、碱洗(2升2mol/L氢氧化钠浸泡6小时)、水洗(纯化水洗涤至中性)，得到预处理的D261树脂。取5升喷司他丁滤液，以每分钟25ml的速率泵入层析柱，收集流出液A。滤液全部上完后再泵入1300ml升纯化水，淋洗层析柱，收集流出液B。合并流出液A、B，呈浅黄色，而喷司他丁的回收率为96.8％。
合成方法[2]
步骤1：3-((2R,4S,5R)-4-羟基-5-(羟甲基)-四氢-呋喃-2-基)-6,7-二氢咪唑 并[4,5-d]-[1,3]二氮杂卓-8(3H)-酮的合成
将1.5g氯化钾溶解于pH 8.0的0.5l 20mM磷酸盐缓冲液中。然后，在搅拌下加入 10g 2'-脱氧尿苷和20ml核苷脱氧核糖基转移酶溶液(10mg/ml)。将所得的溶液加热至25- 30℃，并加入2.0g 6,7-二氢咪唑并[4,5-d][1,3]二氮杂卓-8(3H)-酮盐酸盐单二甲基亚 砜。将反应混合物在25-30℃搅拌3小时。使用低压反相柱色谱法纯化所得的产物，以获得 1.58g(78％)纯物质(通过HPLC测定，纯度大于99％)。
步骤2：(R)-3-((2R,4S,5R)-4-羟基-5-(羟基甲基)-四氢-呋喃-2-基)-3,6,7, 8-四氢咪唑并[4,5-d]-[1,3]二氮杂卓-8-醇(即，喷司他丁)的合成。
在N2气氛下，将1.0g 3-((2R,4S,5R)-4-羟基-5-(羟甲基)-四氢呋喃-2-基)-6,7- 二氢咪唑并[4,5-d]-[1,3]二氮杂卓-8(3H)-酮加入至含有20mgRuCl(对伞花烃)[(R,R)- Ts-DPEN]的烧瓶中。加入10ml三乙胺和3.3ml甲酸的脱气混合物。将反应混合物在N2吹扫下 在40℃搅拌1天，直至达到>99％的转化(如通过HPLC测定)。然后，将反应混合物倒入200ml pH 7.5的100mM磷酸盐缓冲液中。使用低压反相柱色谱法纯化产物，以获得0.84g(83％)纯 的喷司他丁，其具有约1000:1的8R/8S异构体比例(如通过HPLC测定)。
参考文献
[1] [中国发明] CN200910096059.4 一种喷司他丁的提取纯化方法
[2] [中国发明] CN201680039712.1 用于合成喷司他丁的方法