背景及概述[1-4]
4-溴丁酸叔丁酯是一种有机中间体，可由4-溴丁酸和叔丁醇酯化后得到。有文献报道4-溴丁酸叔丁酯可用于制备一种丁香酚人工抗原和一种检测异菌脲的试纸条。
制备[1][3]
报道一、
将4-溴丁酸(3.0g，16.57mmol，1.0eq)同于20mL无水四氢呋喃中，冷却到-40℃，逐滴加入三氟乙酸酐(6.96g，33.14mmol，2.0eq)，-40℃搅拌30分钟，加入叔丁醇(9.83g，132.56mmol，8.0eq)逐渐升值室温，反应过夜。反应完成后，将反应体系倒入饱和碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗涤，减压浓缩得到3.75g淡黄色油状物，收率为95％。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ3.41(t，J＝6.7Hz，2H)，2.25(t，J＝7.3Hz，2H)，1.94-1.85(m，2H)，1.79-1.68(m，2H)，1.44(s，9H).
报道二、
将1M三溴化硼(39ml，39mmol)加入丁内酯(3ml，39mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液。室温下搅拌混合物20h，然后用过量叔丁醇猝灭。室温下搅拌混合物2h，用二氯甲烷稀释，用饱和NaHCO3，饱和Na2S2O3然后盐水洗涤，干燥并真空浓缩。通过快速硅胶色谱法通过isolute纯化残余物(洗脱剂；5％EtOAc∶95％己烷)以获得4-溴丁酸叔丁酯(3g，34％)。
应用[2][4]
报道一、
一种丁香酚人工抗原的合成方法，其由以丁香酚与4-溴丁酸叔丁酯反应得到具有羧基的产物，即为半抗原Euy，再用碳二亚胺法将半抗原Euy与载体蛋白偶联，即得到丁香酚的人工抗原。
1、丁香酚人工抗原的制备步骤为：
（1）半抗原Euy的合成：
MGD_4_1：将K2CO3（378.75mg，2.74mmol）加入到搅拌的4-烯丙基-2-甲氧基苯酚（300mg，1.83mmol）DMF（5mL）溶液中。在室温下搅拌15min后，将4-溴丁酸叔丁酯（428mg，1.92mmol）缓慢加入混合物中。然后将反应混合物在室温下搅拌16h。将水（50mL）加入到反应混合物中，混合物用EtOAc（3×25mL）进行萃取。将合并的有机层用盐水（25mL）洗涤，并用Na2SO4干燥，真空浓缩，得到无色油状物，将其通过快速柱色谱法纯化，得到4-（4-烯丙基-2-甲氧基苯氧基）丁酸叔丁酯（462mg，1.51mmol，产率82.53％），为无色油状物，即化合物MGD_4_1。
MGD_4：将4-（4-烯丙基-2-甲氧基苯氧基）丁酸叔丁酯（924mg，3.02mmol）DCM（5mL）溶液冰浴冷却并搅拌，往溶液中缓慢加入TFA（5mL）。将混合物在0℃下搅拌3h。然后将混合物真空浓缩，得到稻草黄色油状物，将其通过快速柱色谱法纯化，得到4-（4-烯丙基-2-甲氧基苯氧基）丁酸（474mg，1.89mmol，收率62.80％），为淡黄色固体MGD_4，MGD_4即半抗原Euy。
（2）完全抗原Euy-EDC-BSA的制备：采用碳二亚胺法将步骤（1）获得的半抗原Euy与牛血清白蛋白BSA偶联，得到偶联物完全抗原Euy-EDC-BSA。
所述丁香酚人工抗原的合成方法，步骤（2）所述完全抗原Euy-EDC-BSA的制备方法如下：
a、称取步骤（1）获得的半抗原Euy2.2mg，1-乙基碳二亚胺盐酸盐6.7mg，N-羟基琥珀酰亚胺4.0mg，溶解于400μLN,N-二甲基甲酰胺DMF溶液中（称为A液），室温搅拌反应4-6h。取10mg牛血清白蛋白BSA（Euy与牛血清白蛋白BSA摩尔比为60︰1），加入2mLpH8.6、0.01M碳酸盐缓冲溶液CB（称为B液），在室温下逐滴将A液缓慢加入到B液中，室温反应过夜；即得偶联物Euy-EDC-BSA混合液；
b、透析：取10cm的透析袋，于沸水中煮沸5min，再用60℃的去离子水冲洗3min，保存在4℃去离子水中备用；将偶联物Euy-EDC-BSA混合液放入透析袋，并用pH=7.2、0.01M磷酸盐缓冲溶液PBS透析3天，每天换三次透析液，除去未反应的小分子半抗原，得到完全抗原Euy-EDC-BSA，并通过紫外吸收扫描方法进行鉴定。
3、丁香酚人工抗原的鉴定
（1）采用核磁共振和液质联用方法鉴定半抗原。
（2）采用紫外法鉴定人工抗原的偶联效果，利用偶联物中小分子与蛋白的浓度，计算其偶联比。
偶联比测定：估算偶联物中被偶联的两种分子的比率（偶联比率）的方法，虽然测定方法种类很多，但都是依据检测偶联物中被偶联的两种分子含量（或相对含量）的原理建立起来的。紫外法是依据合成的人工抗原中的分子的摩尔浓度与蛋白的摩尔浓度的比确定偶联比的。
用PBS配制0.5mg/mL的蛋白溶液与完全抗原溶液，以PBS建立基线，在波长200~500nm间扫描，得到蛋白溶液与完全抗原溶液在半抗原的紫外吸收特征峰处的吸光值分别为A1，A2；用甲醇配制的半抗原为Xμg/mL，以甲醇建立基线，在波长200~500nm间扫描，得到半抗原紫外吸收特征峰处的吸光值A3，半抗原的相对分子质量为M1，蛋白的相对分子质量为M2，则偶联比=[(A2-A1)(X/M1)/A3]/(0.5/M2)
本方法成功合成丁香酚的人工抗原，合成步骤简单、安全、有效，完全可用于免疫分析中，为以后的研究提供了必需的人工抗原。
报道二、
CN201510973150.5报道了4-溴丁酸叔丁酯可用于制备一种检测异菌脲的试纸条，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板，所述反应膜上有检测区和质控区，检测区包被有异菌脲半抗原-载体蛋白偶联物，质控区包被有抗抗体，所述结合物释放垫喷涂有异菌脲特异性抗体-胶体金标记物。异菌脲特异性抗体-胶体金标记物中的异菌脲特异性抗体是以异菌脲半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述异菌脲半抗原-载体蛋白偶联物是以异菌脲半抗原与载体蛋白偶联制备得到。所述异菌脲半抗原是由2，6-二氯-4-硝基苯酚为起始原料，经过与4-溴丁酸叔丁酯的烃基化反应得到羟基2，6-二氯-4-硝基苯，还原硝基后，得到烃基2，6-二氯苯胺，烃基2，6-二氯苯胺在碳酰氯的作用下，与氨基乙酸缩合，得到烃基2，6-二氯苯甘氨酸酯，再经过成环反应，得到异菌脲主体结构化合物，该化合物再经碳酰氯作用，与异丙胺缩合，得到异菌脲母核结构化合物，在酸性条件下水解反应得到的。