升麻素苷的制备及检测方法

2020/10/25 9:01:40

背景及概述[1][2]

传统中药防风为伞形科多年生草本植物防风Saposhnikovia divaricata ( Turcz) Schischk.的干燥根。其性温,味甘辛,归膀胱、肝、脾经,具有解表祛风、胜湿、止痉等功效。防风是我国重要的传统中药之一,始载于《神农本草经》,列为上品,已有几千年的药用历史。近年来国内外文献对防风的药理作用报道较多,防风提取物及某些成分具有解热、镇痛、镇静、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抗凝血等多种作用。研究表明色原酮类成分为其主要活性成分之一,且该类化合物中的升麻素苷在防风中含量较高,中国药典2010 年版(一部) 中,就以升麻素苷的含量作为评价防风质量的指标。

近些年相关研究从防风中分离提纯得到多种化学成分,如挥发油、杂多糖、色原酮、甘油酯,香豆素、有机酸、和聚乙炔等,这些不同的成分其药理活性也具有一定的差异;其中,色原酮类成分是防风中的主要药效成分,也有相关报道说明,防风提取物及色原酮类单体具有镇痛、解热、镇静等作用,而防风中含有多种色原酮化合物,研究人员通过对防风中提取的色原酮类成分进行分析发现其中的升麻素苷是色原酮类成分的主要活性成分之一。

结构

制备[2]

升麻素苷,中文别名为升麻苷,是中药防风中色原酮的主要活性成分。近年来对于升麻素苷的相关研究已很活跃,并形成了从防风中高效分离纯化升麻素苷的成熟方法。其中,利用超声提取法及回流提取法得到的防风提取物中的色原酮类物质含量整体优于冷浸提取法。在超声提取法中,水与 80%乙醇提取的防风中的色原酮含量较为接近;而利用回流提取法时,样品中的色原酮含量会随着溶剂极性的增加而呈缓慢的上升趋势;另外,利用 ASE 快速溶剂提取法时,用 80%乙醇提取样品中的色原酮含量较高。ASE 快速溶剂提取法与其他方法相比,ASE 提取时间短、溶剂消耗量少、萃取效率高。

药理作用及应用[2][3]

1.解热作用

有研究显示,大鼠腹腔内注射由 95%乙醇提取的防风提取物,能够显著抑制伤寒或副伤寒甲乙三联菌苗引起的大鼠的体温身高。此外,由于酵母、蛋白胨及伤寒、副伤寒甲菌苗精制破伤风类毒素混合制剂导致的大鼠的体温升高现象在注射防风水煎液后,该现象也会有所缓解,这充分的说明其解热属性。同时,防风水煎液对三联疫苗(破伤风疫苗、白喉、百日咳)致热家兔进行腹腔注射,发现在 1-2h 内解热作用最明显;通过对酵母致热的大鼠进行肌肉注射升麻素苷后研究人员发现,在注射该药物 30min 后大鼠的体温开始下降,并且能该退热现象可持续达 3-4h。

2.镇痛作用

防风的止痛作用可通过其中的众多化学成分共同完成,各种成分含量的改变以及因在方剂中与不同药物进行配伍,都会导致镇痛作用发生变化,在众多质中镇痛作用最强的则是色原酮类物质。在醋酸致小鼠扭体的实验中发现,小鼠若通过口服防风水煎液,能够明显减少其发生扭体反应的次数;而通过对醋酸致痛法与温热致痛法进行对比分析,观察发现升麻素苷能够减少醋酸致痛动物扭体的次数并明显提高小鼠的温热痛阈值,这也说明升麻素苷的明显镇痛作用其镇痛的机理包括中枢神经系统作用、抗炎以及对肝代谢酶的作用等。

测定方法[4]

一种防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的测定方法, 包括以下步骤:

步骤1:将防风粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液;S11:将防风粉碎后,过筛;S12:称取0.25重量份罗汉果粉,与0.3重量份硅藻土混合均匀待用;S13:将S12中的混合物移入预先放好过滤膜的萃取池中,加入适量的硅藻土至达到萃取 池的池口;盖上萃取池的盖子进行静态萃取;萃取结束后得到萃取液;萃取条件为:萃取溶剂为甲醇;萃取温度100℃;静态萃取时间5min;冲洗体积100%; 静态循环次数2次。

步骤2:将萃取液稀释过滤后,得到上清液;

步骤3:将上清液采用液相色谱法进行分析;其中,液相色谱法的分析条件为:a)仪器:液相色谱仪;b)色谱柱规格:UltimateXB-C18液相色谱柱3mm*100mm3.0μm;c)柱温:40℃;d)流速:0.3mL/min;e)流动相:甲醇-水,体积比35:65;f)检测波长:254nm。

主要参考资料

[1] 姜超, 李伟, 郑毅男. 植物精提复合酶转化防风中升麻素苷的研究[J]. 药物分析杂志, 2013, 33(7): 1091-1095.

[2] 陈娜. 升麻素苷抗炎及抗小鼠肺损伤作用的研究[D]. 吉林大学, 2014.

[3] CN201410777910.0 升麻素苷作为制备预防和治疗肝损伤性疾病药物的应用

[4] CN201610235064.9 一种防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的测定方法

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