RNA酶III（RibonucleaseIII，简称RNaseIII或RNaseC，BRENDA编号：3.1.26.3）为一类RNA酶，属切割双股RNA的内切酶，均具有RNA酶III结构域。这些酶是一组核糖核酸内切酶，它们的特征在于其核糖核酸酶结构域，其被标记为RNase III结构域。它们是细胞中无处不在的化合物，并且在诸如核糖核酸前体合成， RNA沉默和 p 自动调节机制。
类型
RNA酶III可依结构域分为四型。切割miRNA前驱物的DChemicalbookrosha与Dicer分别属于三型与四型的RNA酶III。
特性
（1）专一性降解dsRNA
（2）活性强，稳定性高，成本低
作用
核糖核酸酶III参与rRNA、SnRNA、SnoRNA与miRNA等RNA的生成过程，可在细胞中的特定位置切割这些RNA的前驱物以产生成熟的RNA。三域生物与部分病毒皆具有RNA酶III。
应用
（1）去除dsRNA
（2）提供siRNA
（3）靶标确认