2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷测定α-L-岩藻糖苷酶及性能评价

2022/11/29 9:55:33

2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷用于检测血清中岩藻糖苷酶(AFU)的含量,研发和大量制备AFU检测试剂。α-L-岩藻糖甘酶(AFU)是一种存在于生物体内的酸性水解酶。大量的研究资料表明,血清AFU在诊断原发性肝癌(PHC)方面有重要价值;因此,建立一种方便、适用的AFU检测方法有着重要意义。有研究人员基于AFU催化水解2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷(CNP-AFU)生成黄色的氯硝基苯酚(CNP),经反复试验确定了实验条件,建立起简便、灵敏、稳定的检测体液中AFU活性的动力学法,该方法试为液体稳定的单一试剂、适用于全自动生化仪操作,并用于血清中AFU活力的测定,均获得满意结果。

2-氯-4-硝基苯-alpha-L-岩藻糖苷的性状图.jpeg

研究方法

1.样本

来自健康体检者血清样本。

2.测定方法

样品中AFU水解试剂中2-氯对硝基-α-L-岩藻吡喃糖苷生成氯硝基苯酚和岩藻糖,而引起在波长405 nm处吸光度的上升,其上升的速率与AFU活力呈正比。通过监测405 nm处吸光度上升的速率,可以计算出样品中AFU的活性。即在实验条件下,1000 mL样品中AFU每分钟水解1 μmol/L的CNP-AFU发生转变为1U的AFU酶量为1个单位,简称U/L。

结论

AFU广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中。参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。由于AFP阴性的原发性肝癌患者AFU明显升高,因此它作为原发性肝癌(PHC)血清酶标志物,其特异性和敏感性愈来愈受到重现,被认为是原发性肝癌的一种新的肿瘤标记物。AFU与腺苷脱氨酶(ADA)联合检测能很好诊断肝癌,与甲胎蛋白(AFP)和CA199联合检测可将原发性肝癌的敏感性大大提高。因此,AFU的检测对肝癌高发人群的检查、肝癌的早期诊断、疗效判断及预后有着极其重要的意义。

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