淀粉酶溶液用于糖原染色

2024/10/14 10:39:23 作者:云霄

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫(PAS)技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,但却不能区别黏蛋白和糖原。若要准确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤;大多数情况下可用淀粉酶溶液来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。

糖原染色

用法

两张相同切片,二甲苯或脱蜡透明液脱蜡,梯度乙醇入水。一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h;另一张不用淀粉酶溶液处理,入水中1h作为对照。流水冲洗两张切片各5~10min。进行糖原PAS染色步骤。

染色结果

糖原、中性唾液黏蛋白:红紫色    

各种糖蛋白:红紫色    

细胞核:蓝色    

未处理的切片,糖原呈亮红色或红紫色;淀粉酶处理的切片,糖原阴性。   

注意事项

1. 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。

2. 最好使用一张阳性对照片验证酶的活性。

3. 避免接触过多的阳光和空气,使用前最好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。

4. 冷冻切片染色时间尽量要短。

5. 淀粉酶溶液开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。

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