藏木香为菊科旋覆花属植物，主要分布在我国四川、青海、甘肃及西藏等地，以根入药，是藏医、蒙医常用药材。藏木香性温，味甘、辛、苦，具有行气镇痛、调气解郁、健脾消食、止痛安胎的功效，主要用于胸肋、脘腹胀痛、慢性胃炎、胎动不安等病症。藏木香中含有多种化学成分，研究表明土木香内酯(alantolactone,1)和异土木香内酯(isoalantolactone,2)是其主要活性成分，具有显著的抗炎、保肝、抑菌和调节心脏机能等作用。其含量的高低直接影响藏木香的质量与疗效。
高纯度的对照品是药材鉴别和质量评价的前提条件。目前尚未见关于土木香内酯和异土木香内酯对照品制备方法的报道。本试验主要考察了二者的制备方法。由于土木香内酯和异土木香内酯双键位置的差异，与Ag+形成配合物的牢固程度不同，可采用Ag+络合柱色谱法初步分离两者，然后通过制备型HPLC法进行快速纯化，从而得到纯度较高的土木香内酯、异土木香内酯对照品。
制备方法
1、对照品粗品的制备
取干燥的藏木香根茎药材适量，用粉碎机粉碎，过2号筛，得粉末。以石油醚浸泡过夜，过滤，滤液浓缩成稠膏状，以冻干机冻干，得到淡黄色粉末。取该粉末适量,按样品与硅胶(含有0.25%硝酸银)1:50的比例装柱，以苯:石油醚:乙酸乙酯(15:3:3)进行洗脱，TLC法检查，10%硫酸乙醇显色，收集与目标化合物具有相同Rf值的蓝色斑点部分，浓缩，即得土木香内酯和异土木香内酯的粗品。经过HPLC检测，采用外标法，测得土木香内酯含量为35.8%，异土木香内酯含量为40.4%。
2、对照品的色谱分离条件
2.1、分析型液相色谱条件
色谱柱Welchrom C18柱(4.6mm×250mm，5um)；流动相乙腈:0.1%磷酸(60:40)；流速1.0ml/min；柱温：25℃；检测波长194nm；进样量10ul。
2.2、制备型液相色谱条件
色谱柱DAC-HB50 C1动态轴向压缩柱(50mm×450mm，10um)；流动相乙腈:0.1%磷酸(55:45)；流速50ml/min；柱温25℃；检测波长194nm；进样量2ml。
3、溶液配制
对照品溶液：分别精密称取土木香内酯和异土木香内酯对照品14.26和14.38mg，置10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，配成浓度为1.426和1.438mg/ml的混合溶液，经0.45um微孔滤膜过滤后备用。
供试品溶液：称取粗品土木香内酯和异土木香内酯适量，用甲醇溶解，配制成浓度约40mg/ml的溶液，用0.2um微孔滤膜过滤即得。
4、对照品的分离纯化
取供试品溶液按上述制备型色谱条件制备，所得色谱图如下图。分别收集图中土木香内酯1部分(32~35min)和异土木香内酯2部分(25~29min)。回收溶剂后得土木香内酯和异土木香内酯。分别精密称取所得土木香内酯2.01mg和异土木香内酯2.15mg，置10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，分别配成浓度为0.201和0.215mg/ml的溶液。经0.45um微孔滤膜过滤后备用。按分析型色谱条件测定，以外标法计算，测得土木香内酯纯度为99.1%，异土木香内酯纯度为99.4%。
参考文献
[1]张新新,杨洋,刘胜家,等. 藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的制备[J]. 中国医药工业杂志,2014,45(2):116-119.