丽春红染色液的染色原理与步骤

2025/8/19 14:36:27 作者:云霄

丽春红染色液(又名酸性红112,也有人叫猩红)是一种红色染料,也是一种重氮染料,用于WB中蛋白质的可逆染色。1986年,O Salinovich和R C Montelaroused 首次将其作为考马斯亮蓝色染色的替代品。

丽春红染色液染色效果

应用领域

丽春红染色液既可以对NC膜进行染色,也可以对PVDF膜进行染色。注意通常不对尼龙膜进行染色,因为染色液和尼龙膜强烈结合并产生高背景。

丽春红染色液的检测蛋白质的下限是200ng。虽然检测能力很低,但由于其染色的可逆性和与其他染色液相比价格低廉,它是最常用的染色液之一。由于可逆染色(对蛋白质没有不利的影响),所以染色后的样品可用于其他下游检测,如免疫印迹和蛋白质测序等。

染色原理

丽春红染色液本身带大量的负电荷,因此可以和氨基酸上的正电荷结合,另外丽春红染色液也能够和蛋白质的非极性区结合,从而使蛋白质呈现红色。

染色步骤

(1)取出待染色的膜,用TBST或PBST洗一遍。

(2)加入丽春红染色液将膜浸没,室温孵育1小时,染色时间相对灵活。

(3)回收丽春红染色液(可以重复使用)。用蒸馏水清洗去除背景。

(4)染色的膜可以在温室或者4℃保存。

丽春红染色液脱色:用5%的醋酸和0.1M NaOH溶液。脱色液可用蒸馏水或者PBS。

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