简介
(+)-生物素-PEG2-NHS酯是一种白色或类白色固体，可溶于有机溶剂。它是一种生物素衍生物，具有较强的生物素亲和力。(+)-生物素-PEG2-NHS是一种常用的生物偶联试剂，具有广泛的应用。它可以与生物素靶向分子结合，从而用于检测、定量和纯化目标物质，如蛋白质和核酸。
背景技术
生物素与链亲和素之间的紧密相互作用在生物化学和化学生物学中得到了广泛的应用，许多生物素偶联物已被开发出来用于目标蛋白的鉴定、标记或功能化生物素偶联物也被应用于全基因组分析技术的开发。例如，ChIP测序（ChIP-seq）将染色质免疫沉淀（ChIP）与大规模平行测序相结合，以全基因组的方式鉴定DNA结合蛋白的结合位点3,4，但化学亲和力捕获，如生物素-亲和素相互作用，也可以用作抗原-抗体相互作用的替代方法。常常引入生物素化的片段可能会导致配体活性的丧失。因此，本文将介绍开发保留生物活性的新型生物素偶联转录调节化合物是一项非常重要的工作。在此，本文将介绍一种人工合成的类维甲酸Am580与(+)-生物素-PEG2-NHS酯偶联物合成，便于进一步的生物学评价。
偶联反应[1]
1、向化合物9（36 mg，0.065 mmol）和三乙胺（5滴）的乙腈（3 mL）溶液中，于0℃加入化合物(+)-生物素-PEG2-NHS酯(14，25 mg，0.05 mmol）。溶液在室温下搅拌5小时后，蒸发除去溶剂，残余物用氯仿从饱和氯化铵水溶液中萃取。有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。溶剂蒸发后，粗产物通过硅胶柱层析纯化（洗脱剂：氯仿/甲醇=5/1），得到淡橙色固体10（36mg，产率67%）。
2、向化合物11（43毫克，0.067毫摩尔）的二氯甲烷（4毫升）溶液中加入10滴三氟甲基乙酸，反应液在室温下搅拌40分钟。真空除去溶剂后，残余物溶于乙腈（5毫升），并加入5滴三乙胺，于0℃向该溶液中加入化合物(+)-生物素-PEG2-NHS酯(14，34毫克，0.067毫摩尔），反应混合物在室温下搅拌70小时。溶剂蒸发后，残余物用氯仿和水萃取，有机相经硫酸钠干燥。溶剂蒸发后，粗产物通过硅胶柱层析纯化（洗脱剂：氯仿/甲醇=4/1），得到白色固体13（51毫克，两步产率82%）。
参考文献
[1]SHINYA FUJII, SHUICHI MORI, HIROYUKI KAGECHIKA, et al. Development of biotin-retinoid conjugates as chemical probes for analysis of retinoid function[J]. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters,2018,28(14):2442-2445. DOI:10.1016/j.bmcl.2018.06.011.