人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒是一种商业化的生物试剂检测盒，在生物化学研究领域中主要用于定量检测细胞培养上清、血清、血浆中人Bcl2 相关髓细胞白血病序列1。人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术，将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标准品中的待测物MCL1，清洗后再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗，即可形成“捕 获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物。
图1 使用人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒分析的参考示意图
背景介绍
人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒用于Bcl2 相关髓细胞白血病序列1的检测，Bcl2 相关髓细胞白血病序列1也被称为MCL1，是由MCL1基因编码的蛋白质，该基 因编码的蛋白质属于Bcl-2家族，可变剪接发生在该基因座处，并且已鉴定出编码不同同种型的两种转录变体，较长的基因产物（同种型1）通过抑制细胞凋亡来提高细胞存活率。使用人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒常用的样品类型为组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体。[1]
特异性
人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒可检测样本中人的MCL1，且与其类似物无明显交叉反应。[1]
检测原理
人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标 准品中的待测物MCL1，清洗后，再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗，形成“捕 获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物，随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育，待孵育结束后清洗，接着加入TMB显色后，若样本中有待测物则显蓝色，加入终止液停止反应。人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒的检测过程中游离的成分均被洗去，用酶标仪在450nm处测OD值，颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比，通过绘制标准曲线计算出样本中MCL1的浓度。
使用说明
使用人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒时应该注意如果样品产生的值高于最高标准，则用测定稀释剂进一步稀释样品，并重复测定。稀释剂、实验员、移液技术、洗涤技术、培养时间或温度以及试剂盒使用年限的任何变化都可能导致结果变化。人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒的实验设计消除了不同生物样品中可能潜在的干扰因素的影响，但并不能涵 盖所有潜在影响因素。不能排除存在其他干扰的可能性。
注意事项
使用人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒时在混合蛋白质溶液时，应始终避免起泡。为了避免交叉污染，在添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。此外，每种试剂应单独使用容器。确保试剂不间断地添加到板孔中。为了确保准确的结果，在孵育步骤中需要粘合好封板膜。当使用自动洗板机时，在加入洗涤缓冲液后加入30秒的浸泡期，或者在洗涤步骤之间将板旋转180度，可以提高测定精度。显色剂应保持无色，直到添加到板中。确保显色剂不受光线照射。显色剂应从无色变为蓝色。加入终止液后，孔中形成的颜色将从蓝色变为黄色。绿色的孔表示终止液未与基质溶液充分混合。人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒提供的终止液为稀硫酸溶液，具有一定腐蚀性，应谨慎操作。人BCL2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA检测试剂盒中的某些成分含有防腐剂，可能会引起皮肤过敏反应，应佩带口罩避免吸入薄雾。 显色剂B可能会引起皮肤、眼睛和呼吸道刺激，应佩带口罩避免吸入薄雾。
参考文献
[1] Wu N, et al. Effects of Sidaxue, a Miao ethnomedicine recipe, on apoptosis and pyrolysis of human fibroblast-like synovial cells in rheumatoid arthritis[J]. Nan Fang yi ke da xue xue bao= Journal of Southern Medical University, 2021, 41: 1473.