研究背景
凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex，TAT)是人体内凝血和抗凝血相互作用以维持生理平衡的产物，是凝血酶生成的标志物之一，检测TAT对诊断和治疗弥漫性血管内凝血(DIC)、深静脉血栓(DVT)和急性心肌梗死(AMI)都有重要的意义。对监控肿瘤、器官移植、肝病和怀孕等生理病理状态下凝血-抗凝血的变化也很有意义[1]。小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒是以凝血酶抗凝血酶复合物抗体为主要作用物的测定产品。
原理
关于该类试剂盒的作用机理，我们可以从“人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒”的相关介绍做一简单了解[2]。具体地，应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中TAT水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入TAT抗原，生物素化的抗TAT抗体，HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TAT呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
生产实例
凝血酶抗凝血酶复合物研究领域报道了多种不同的试剂盒产品，例如，生物技术领域报道了一种凝血酶抗凝血酶复合物检测试剂盒。该试剂盒包含两种单克隆抗体，一种单克隆抗体不与凝血酶原，凝血酶反应，但与TAT，ATIII反应；一种单克隆抗体不与ATIII，但与凝血酶原，凝血酶，TAT反应；这两种抗体测定TAT时添加凝血酶原不影响两个抗体对TAT的检测，不会对凝血酶原产生交叉反应，且能够应用到不同的试剂盒中实现高灵敏度和高精度的检测。对于凝血酶抗凝血酶复合物的检测具有重大意义[3]。本篇我们所介绍的小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒的生产研究也可以采取上述工艺，只不过抗体来源限定小鼠。
有关研究
为了分析凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)，纤溶酶-α2-纤溶酶抑制剂复合物(PIC)和血栓弹力图(TEG)评估肿瘤患者凝血功能的价值。方研究人员选取一定数量的肿瘤患者与同期体检健康者做对照实验。比较2组TAT，PIC，TEG各参数的差异。结果发现， 病例组TAT，PIC高于对照组(P<0.05)。血栓极高风险组TAT，PIC高于中/低风险组(P<0.05)。肝癌，肺癌，肠癌，胃癌患者TAT，PIC水平均升高，但差异无统计学意义(P>0.05)。TAT，PIC，TEG评价肿瘤患者血液高凝状态的敏感性分别为85.0%，55.0%，56.70%，特异性分别为93.3%，81.7%，70.0%，ROC曲线下面积分别为0.94，0.72，0.63。也就是说，TAT，PIC可早于TEG提示肿瘤患者凝血功能异常，能更好地提示肿瘤患者血液高凝状态[4]。因此，能够针对TAT做精准高效检测的小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒的生产与研究具有重要意义。
参考文献
[1]陈红兵,郑佐娅,王鸿利.凝血酶-抗凝血酶复合物的检测和临床应用[J].国外医学(临床生物化学与检验学分册), 2001.
[2]人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒[J].
[3]蒋会会,李伯宏,边颖,等.一种凝血酶抗凝血酶复合物检测试剂盒:CN202310238650.9[P].
[4]赖媛媛,何振业,沈化清,等.凝血酶-抗凝血酶复合物,纤溶酶-α2-纤溶酶抑制剂复合物和血栓弹力图评估肿瘤患者凝血功能的价值[J].检验医学, 2024, 39(1):43-46.DOI:10.3969/j.issn.1673-8640.2024.01.008.