4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐，简称AEBSF，是一种重要的生物化学试剂，白色或灰白色结晶。4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐是一种水溶性、不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂，能广谱抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶和凝血酶等的活性。主要用于生物化学研究中，还可用于合成胡椒酸分子探针等。
应用研究
1、徐锦华等人采用Tris-HCl缓冲溶液提取、硫酸铵盐析、透析及超滤获得刺参体壁粗酶液。结果显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,粗酶液的丝氨酸蛋白酶活力最高;以其为底物,测得该类蛋白酶在pH值为6.2和8.5时呈现较强酶活力峰值,两者最适温度范围均为50～55℃;Cu2+、Fe3+、Pb2+、Zn2+强烈抑制该酶的活性,Ca2+可提高该酶活力;邻菲咯啉、乙二胺四乙酸以及半胱氨酸修饰剂均能够部分抑制该酶活力。4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐、苯甲基磺酰氟、Na-对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮、(3S)-7-氨基-1-氯-3-磺酰氨基-2-庚酮盐酸盐、大豆胰蛋白酶抑制剂能够显著抑制蛋白酶的活力以及自溶过程中可溶性蛋白、三氯乙酸可溶性多肽的生成。上述结果表明,刺参体壁中存在至少2种具有一定的金属离子依赖性的胰/类胰丝氨酸蛋白酶,其活性中心或底物识别位点可能有半胱氨酸的参与,该类蛋白酶很可能参与刺参自溶过程中蛋白质的降解[1]。
2、苏敏等人研制了一种基于多肽微阵列芯片的荧光和共振光散射双通路检测方法,对血液样品中的凝血酶抑制剂进行检测。以生物素化的多肽微阵列芯片为反应平台,加入凝血酶水解多肽上的特异位点使其C末端的生物素解离,通过亲和素和生物素之间的特异性结合,用荧光探针和30nm金纳米粒子探针标记此反应过程。凝血酶抑制剂阻止凝血酶对底物多肽的水解反应,通过荧光和共振光散射信号强度的变化检测抑制剂的抑制能力。酶溶液和加标人血清中测定的半抑制浓度(IC50)值：阿加曲班<抗凝血酶Ⅲ<4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐,IC50差的绝对值随抑制剂特异性的减弱而增大。当抑制剂浓度为7.5μmol/L时,血浆中5种化合物的抑制能力：阿加曲班>抗凝血酶Ⅲ>胰蛋白酶抑制剂>N-(反式-环氧丁二酰基)-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺>4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐。在血浆中考察了阿加曲班和抗凝血酶Ⅲ的可逆性。对比荧光法和共振光散射法在血液样品中的检测结果,用30nm金纳米粒子标记的共振光散射法更适用于复杂血液样品中抑制剂的检测[2]。
参考文献
[1] 徐锦华,孟泽玲,葛诗琪,等. 刺参体壁胰/类胰丝氨酸蛋白酶的性质及其在自溶中的作用[J]. 食品科学,2019,40(18):95-100. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20181004-019.
[2] 苏敏,李桃,刘殿骏,等. 基于多肽微阵列芯片的荧光和共振光散射法筛选凝血酶抑制剂[J]. 分析化学,2015(2):199-206. DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.140532.